[发明专利]一种提高油用牡丹籽含油率的转基因方法有效
| 申请号： | 201711461404.0 | 申请日： | 2017-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN108070603B | 公开（公告）日： | 2021-06-08 |
| 发明（设计）人： | 胡政委 | 申请（专利权）人： | 洛阳健特药业有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/53 | 分类号： | C12N15/53;C12N15/82;A01H5/10;A01H6/72 |
| 代理公司： | 洛阳公信知识产权事务所(普通合伙) 41120 | 代理人： | 时亚娟 |
| 地址： | 471000 河南省洛阳市中国（河南）自由贸易*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提高 牡丹 含油率 转基因 方法 | ||
1.一种提高油用牡丹籽含油率的转基因方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤一：设计引物，分别扩增3’和5’端均带有酶切位点的
步骤二、制备感受态根癌农杆菌GV3101，将构建的多基因植物表达载体进行根癌农杆菌的转化，验证正确后获取阳性根癌农杆菌；无菌条件下将阳性根癌农杆菌培养至对数期，形成浸染液，备用；
步骤三、取生长状况良好的牡丹新生幼嫩叶片，在无菌条件下消毒并置于1/2MS培养基上，20-22 ℃于暗处预培养2-3天，用浸染液浸染后在黑暗条件下共培养2-3天，然后转入到诱导培养基上进行愈伤组织的诱导；愈伤组织形成后，将愈伤组织从基部切下，转至MS培养基上培养，获取无根苗，再将无根苗转入生根培养基上培养，获取牡丹苗，驯化移栽于温室内，之后按照常规方法进行管理；
步骤三所述诱导培养基为1/2 MS + 0.1-0.5mg/L GA3 + 0.2-1.0mg/L 激动素+0.1-0.3mg/L谷胱甘肽+0.2-0.4mg/L硫酸亚铁；
步骤三所述生根培养基为1/2 MS + 0.2mg/L NAA + 1.0mg/L IBA + 25g/L蔗糖 +0.5g/L聚乙烯比咯烷酮+ 1.0-1.3g/L维生素C+3.0g/L活性炭；
步骤三所述愈伤组织诱导培养中，控制培养光照为20h/d，光照强度为15-18μmol/(m2.s)。
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