[发明专利]一种番石榴叶中黄酮类物质槲皮素的提纯方法

说明书

本发明公开了一种番石榴叶中黄酮类物质槲皮素的提纯方法，包括如下步骤：(1)将番石榴叶粉碎后加入水，加热，过滤，得到番石榴叶提取物黄酮粗品；(2)溶于无水乙醇溶液，过滤后取上清液进行超滤循环，得到超滤膜过滤溶液；(3)将槲皮素单体作为模板分子溶于乙腈中，加入功能单体4‑乙烯基吡啶制备分子印迹聚合物；(4)分子印迹聚合物中加入超滤膜过滤溶液，于恒温摇床中进行密闭震荡，离心后得到所述的黄酮类物质槲皮素。本发明的提纯方法，分离出来的料液再用合成的印迹聚合物进一步精制提纯，获得纯化的番石榴叶黄酮类物质槲皮素，工艺简单环保，成本低收益高，提纯效果好。

技术领域

本发明属于番石榴叶化合物提纯领域，尤其涉及一种番石榴叶中黄酮类物质槲皮素的提纯方法。

背景技术

番石榴(Psidium guajava Linn.)桃金娘科乔木，原产南美洲。中国华南各地栽培，常见有逸为野生种，北达四川西南部的安宁河谷，生于荒地或低丘陵上；果供食用；叶含挥发油及鞣质等，供药用，有止痢、止血、健胃等功效；叶经煮沸去掉鞣质，晒干作茶叶用，味甘，有清热作用。对番石榴叶的化学成分研究表明：番石榴叶中含有蛋白质、多糖、多酚、黄酮类化合物和三萜类化合物等。

黄酮类化合物(flavonoids)是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮(flavone)结构的化合物。它们分子中有一个酮式羰基，第一位上的氧原子具碱性，能与强酸成盐，其羟基衍生物多具黄色，故又称黄碱素或黄酮。黄酮类化合物在植物体中通常与糖结合成苷类，小部分以游离态(苷元)的形式存在。绝大多数植物体内都含有黄酮类化合物，它在植物的生长、发育、开花、结果以及抗菌防病等方面起着重要的作用。

槲皮素，又名栎精，是黄酮类化合物的一种，槲皮黄素，溶于冰醋酸，碱性水溶液呈黄色，几乎不溶于水，乙醇溶液味很苦。可作为药品，具有较好的祛痰、止咳作用，并有一定的平喘作用。此外还有降低血压、增强毛细血管抵抗力、减少毛细血管脆性、降血脂、扩张冠状动脉，增加冠脉血流量等作用。用于治疗慢性支气管炎，对冠心病及高血压患者也有辅助治疗作用。

传统的番石榴叶提取物的分离主要采用溶剂法、大孔树脂吸附法、微波提取法、超声波提取法、超临界萃取法，但这些方法工艺复杂，提纯效果差，不符合节能环保的要求，成本高且收益低。而毛细管电泳法、酶法一般用于提纯微量或痕量的物质，对提纯条件要求较高，不适用于工业提纯。因此研发新的分离提纯技术用于工业，以获得更高的总黄酮质量分数的番石榴叶提取物产品十分重要。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，克服以上背景技术中提到的不足和缺陷，提供一种番石榴叶中黄酮类物质槲皮素的提纯方法。

为解决上述技术问题，本发明提出的技术方案为提供一种番石榴叶中黄酮类物质槲皮素的提纯方法，包括如下步骤：

(1)将番石榴叶粉碎后过筛，在得到的番石榴叶粉中加入水，加热，过滤，得到番石榴叶提取物黄酮粗品；

(2)将所述步骤(1)后得到的黄酮粗品溶于无水乙醇溶液，过滤后取上清液导入超滤装置中进行超滤循环，得到超滤膜过滤溶液；

(3)将槲皮素单体作为模板分子溶于乙腈中，加入功能单体4-乙烯基吡啶后于室温下搅拌，使模板分子与功能单体充分作用，然后加入交联剂和引发剂，充分混匀后进行超声以除去溶解的氧气，通入氮气形成无氧环境，密封后置于恒温油浴锅中进行热聚合，聚合产物用甲醇-乙酸溶液于索氏提取器中洗脱，以脱除模板分子，再用甲醇洗去过量的乙酸，于真空烘箱中真空干燥，得到合成后的分子印迹聚合物；

(4)精确称取所述步骤(3)合成后得到的分子印迹聚合物，加入所述步骤(2)后得到的超滤膜过滤溶液，于恒温摇床中进行密闭震荡，得到吸附有槲皮素的分子印迹聚合物，离心后得到所述的黄酮类物质槲皮素，离心后的分子印迹聚合物可以重复使用。

上述的提纯方法，优选的，所述步骤(1)中，过筛为过40-60目筛，加入的水体积为番石榴叶粉体积的38-42倍。