[发明专利]一种快速培育落叶冬青组培苗的方法

说明书

本发明公开了一种快速培育落叶冬青组培苗的方法，包括：1）将经常规消毒、接种方法获得的腋芽，经初代培养后获得1.5~2.0cm的无菌芽；将无菌芽剪切转接入增殖培养基中，先培养产生少量丛生芽，然后继代培养获得大量的丛生芽；2）将增殖培养后的落叶冬青丛芽转接入壮苗培养基中，培养25d后，丛芽继续增殖，且有效苗数量增加；3）剪取3.0cm以上的壮芽接种到生根诱导培养基中，15~25d后开始生根，培养35~45d后，再生植株长至5.0~6.0cm以上，小苗健壮；4）待生根的小苗长至5.0~6.0cm以上、根8~10条时，将小苗进行炼苗、驯化移栽，成活后获得组培苗。本发明操作简单、易行，增殖与壮苗需要75天，诱导生根提前至15~25天，芽苗最高增殖率达415~446%，生根率达65~80%，移栽成活率达85%~90%以上。

技术领域

本发明涉及落叶冬青组培技术领域，具体涉及一种快速培育落叶冬青组培苗的方法。

背景技术

落叶冬青(Ilex verticillata L.)是引自北美地区东部的一种冬青科冬青属的落叶灌木，雌雄异株，通常分布于沼泽与池塘的周围，有许多栽培品种。落叶型冬青与其它常绿冬青树种不同，其特点是冬季落叶，鲜艳饱满的红色果实挂满枝头，挂果期可至翌年4月，给寒冷的严冬带来温暖和喜庆的颜色，是冬季赏果的最佳树种之一。即可用作商业切枝又可做庭院绿化、室内盆景、冬季游园观赏之用，极具园林观赏和商业价值。落叶型冬青引种到我国的时间不长，苗木数量较少。为保持落叶冬青的观赏价值，扩大推广范围，无性繁殖是保持遗传特色的最好方法，而组织培养法是快速获得大量繁殖苗的最佳方法。但由于目前落叶冬青组培苗增殖系数少、生根慢、生根率低，限制了其大规模的推广和繁殖。

发明内容

发明目的：针对现有技术中繁殖系数和生根率低，生根时间长等存在的不足，本发明的目的是提供一种快速培育落叶冬青组培苗的方法，采用组织培养的方法对不同落叶冬青品种的腋芽进行增殖、壮苗、生根培养，建立快速获得再生植株的技术方法，解决了落叶冬青扦插繁殖受季节和种苗限制、组培苗增殖率低、生根慢、生根率低、移栽成活率低等难题，适合多个引种落叶冬青品种，可加快引种落叶冬青的繁殖速度和规模，具有较强的实用性。

技术方案：为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案为：

一种快速培育落叶冬青组培苗的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）取经常规消毒、接种方法获得的腋芽，进行初代培养，获得1.5~2.0cm的无菌芽；将无菌芽剪切转接入增殖培养基中，先培养产生少量丛生芽，然后以25d为继代周期，将带有5~6个小芽的芽丛再转接入增殖培养基中，获得大量的丛生芽；增殖培养基为：MS+0.5mg/L NAA+0.5mg/L 6-BA+1.0mg/L CPPU（氯吡苯脲），

或MS+0.1mg/L NAA+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L CPPU +1.0mg/L GA（赤霉素），

或MS+0.5 mg/L NAA+0.2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L CPPU（氯吡苯脲）；

2）将增殖培养后的落叶冬青丛芽转接入壮苗培养基中，培养25d后，丛芽继续增殖，且有效苗数量增加；壮苗培养基为：MS+0.1 mg/L NAA+0.5mg/L 6-BA+0.5 mg/L CPPU+ 1.0GA；

3）剪取3.0cm以上的壮芽接种到生根诱导培养基中，15~25d后开始生根，培养35~45d后，再生植株长至5.0~6.0cm以上，小苗健壮；生根培养基为：1/2MS+1.0 IBA+1.0 g/L AC（活性炭），或1/2MS+0.1 mg/L IBA+1.0 g/L AC。

4）待生根的小苗长至5.0~6.0cm以上、根8~10条时，将小苗进行炼苗、驯化移栽，成活后获得组培苗。