[发明专利]一种气相色谱检测氟尿嘧啶中苯残留的方法在审
申请号: | 201711475887.X | 申请日: | 2017-12-29 |
公开(公告)号: | CN107957461A | 公开(公告)日: | 2018-04-24 |
发明(设计)人: | 吴玉祥;许佳慧;顾蓉;蒋璐;滕飞 | 申请(专利权)人: | 精华制药集团南通有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02 |
代理公司: | 北京一格知识产权代理事务所(普通合伙)11316 | 代理人: | 滑春生 |
地址: | 226400 江苏省南通市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 色谱 检测 嘧啶 残留 方法 | ||
技术领域
本发明属于生物化工技术领域,尤其涉及一种用气相色谱法检测氟尿嘧啶中苯残留的方法。
背景技术
氟尿嘧啶(Fluorouracil,5-FU),分子式C4H3FN2O2,分子量130.08,为白色或类白色的结晶或结晶性粉末。本品在水中略溶,在乙醇中微溶,在三氯甲烷中几乎不溶,在稀盐酸或氢氧化钠溶液中溶解。氟尿嘧啶是抗嘧啶类药物,临床上用于多种肿瘤如消化道肿瘤、乳腺癌、卵巢癌、绒毛膜上皮癌、宫颈癌、膀胱癌、肝癌、皮肤癌等的治疗有效,尤对消化道癌及其他实体瘤有良好疗效,可静脉或腔内注射,口服吸收不完全。
目前,工业上生产氟尿嘧啶通常采用的方法是缩合环化法。该方法主要以氟乙酸甲酯为原料,在甲醇钠、甲苯催化下与甲酸乙酯缩合得氟代甲酰乙酸酯烯醇式钠盐(化合物Ⅰ),化合物Ⅰ与O-甲基异脲硫酸盐环合得2-甲氧基-5-氟尿嘧啶(化合物Ⅱ),Ⅱ在稀盐酸中水解为5-氟尿嘧啶。根据ICH指南的要求苯的残留限度为2ppm,因此,氟尿嘧啶中苯含量的测定对于氟尿嘧啶的质量、患者的健康方面均具有重要的意义。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的不足,现提供一种提供能实现检测的连续性,提高检测的灵敏度及重复性的气相色谱检测氟尿嘧啶中苯残留的方法。
为解决上述技术问题,本发明采用的技术方案为:一种气相色谱检测氟尿嘧啶中苯残留的方法,其创新点在于:包括以下步骤:
步骤1.苯标准液的配制:a.称取0.05g苯加入到100mL容量瓶中,用乙醇溶液定容,然后精密吸取1.0mL于100mL另一容量瓶中,用乙醇溶液定容,得到苯标准储备液;b.精密吸取1.0mL苯标准储备液于25mL容量瓶中,用乙醇溶液定溶,即得苯标准液;
步骤2.样品供试液的配制:精密称取氟尿嘧啶样品1.0g,置于10ml容量瓶中,乙醇溶液定容,即得供试液;
步骤3.设定色谱仪的工作条件:色谱柱为HP-5毛细管色谱柱,大小为30m×0.32mm×0.25μm,进样口温度为260℃,检测器温度为260℃,氮气流速为30mL/min,氢气流速为40mL/min,空气流速为400mL/min,分流比为50:1,进样量为1μL;
步骤4.进样检测:将步骤1和步骤2得到的溶液注入配有氢火焰离子化检测器的气相色谱仪,通过色谱数据处理机,得到标准品色图谱和样品色谱图,所述进样顺序为以第一针空白样,然后连续五针标准液,接着进样品供试液,最后再进一针标准液的进样顺序依次进样检测;
步骤5.结果计算:根据标准色谱图和样品色谱图计算氟尿嘧啶中苯的含量,所述计算公式为:
式中:
A样—样品供试液中苯的峰面积;
A标—标准液中苯的峰面积;
C样—样品供试液中氟尿嘧啶的浓度,g/mL;
C标—标准液中苯的浓度,g/mL。
进一步的,所述步骤3中柱温采用程序升温,初始温度60℃,保持2min,以5℃/min升温速率升至80℃,保持5min,以30℃/min升温速率升至220℃,保持2min。
进一步的,所述步骤4中连续进样品的针数不得超过十针,多余十针的则每十针之间再交叉进一针标准液。
本发明的有益效果如下:
(1)本发明通过气相色谱仪检测氟尿嘧啶中苯的残留量方法简便、快捷、准确、稳定、可靠,能更加全面、客观、科学地评价氟尿嘧啶的质量,对患者的健康方面均具有重要的意;本发明整个工艺具有检测速度快、操作方便、精确度高的优点;
(2)本发明通过优化检测色谱条件,在保证了各峰分离度较好的前提下,乙醇保留时间为1.78min,苯保留时间为3.51min,大大缩短了分析时间;
(3)本发明通过优化了检测色谱条件,苯的检测限为0.19μg/mL,定量限为0.4μg/mL,回收率在99~101%之间,大大提高了检测的灵敏度。
附图说明
图1为本发明空白溶剂检测得到的气相色谱图;
图2为本发明标准液检测得到的气相色谱图;
图3为本发明苯标准液线性关系图;
图4本发明检测限溶液的色谱图;
图5为本发明定量限溶液的色谱图;
图6为本发明供试液检测得到的气相色谱图。
具体实施方式
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