[发明专利]一种奥利万星的纯化方法

说明书

本发明提供一种奥利万星的纯化方法，包括以下步骤：步骤(1)，将奥利万星粗品溶解于乙腈水溶液中，然后上聚合物微球层析柱进行柱层析，收集奥利万星含量大于98.5％的层析液；步骤(2)，收集的层析液脱除溶剂后浓缩，得到奥利万星浓缩液；步骤(3)，过滤后冷冻干燥，得到奥利万星粉末。本发明的一种奥利万星的纯化方法：通过聚合物微球层析，得到最终高纯度的奥利万星，杂质含量大大下降；该方法仅通过一步层析即可达到奥利万星含量大于98.5％的目标，方法简易；该方法采用磷酸盐、甲醇/乙醇/乙腈作为层析的流动相，易于后续处理和溶剂回收，可以通过纳滤膜进行浓缩处理，操作方便；该纯化方法不仅提高了产品品质，而且适合于扩大的商业化生产。

技术领域

本发明属于化学提纯技术领域，具体涉及一种高纯度奥利万星的纯化方法。

背景技术

奥利万星(oritavancin，LY333328)是在第一代糖肽抗生素万古霉素的基础上开发的第二代糖肽抗生素，最早由Lilly公司研究开发，是由微生物Amycolatopsisorientalis发酵产生的A82846B与4’-联苯甲醛反应产生的衍生物。2014年8月6日，FDA已批准奥利万星注射液用于由敏感革兰氏阳性菌(包括耐甲氧西林黄色葡萄球菌，MRSA)导致的急性细菌性皮肤和皮肤结构感染(ABSSSIs)成人患者的治疗。

由于半衰期较万古霉素大大延长，奥利万星是FDA批准用于ABSSSIs治疗的首个和唯一一种单剂量治疗方案的抗生素。患者仅接受一次奥利万星输液，整个治疗方案便已结束。

奥利万星化合物专利CN1119649中公开了奥利万星及其类似物的纯化方法：利用C18反相制备HPLC，并以含三乙胺(以磷酸调节pH值至3.0)的乙腈水溶液梯度洗脱，分步收集样品后再经层析柱脱盐得到奥利万星样品。该专利所涉及的工艺操作比较复杂，而且使用C18制备不适宜于工业化操作。

奥利万星生产工艺专利WO2016/011245A1也公开了奥利万星的纯化方法：经衍生化反应后得到奥利万星与铜的复合物，复合物经聚苯乙烯-二乙烯基苯树脂吸附，以含磷酸二氢铵(以磷酸调节pH值)的乙腈水溶液洗脱，收集样品后经膜过滤、脱盐、干燥得到色谱纯度95％左右的奥利万星样品。经该专利生产得到的奥利万星样品纯度还是不够高，杂质含量达到4％以上。

鉴于奥利万星的用药安全性，需要提供高纯度的奥利万星产品。然而，从目前的文献资料看，由于存在种种的缺陷，还没有一种制备高纯度(色谱纯度达到98.5％以上)的适用于商业化生产的奥利万星生产方法。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术中的不足，提供一种高纯度(色谱纯度达到98.5％以上)、低杂质、高效率的适用于商业化生产的奥利万星的纯化方法。

为实现以上目的，本发明通过以下技术方案实现：

一种奥利万星的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤(1)，将奥利万星粗品溶解于乙腈水溶液中，然后上聚合物微球层析柱进行柱层析，收集奥利万星含量大于98.5％的层析液；

步骤(2)，收集的层析液脱除溶剂后浓缩，得到奥利万星浓缩液；

步骤(3)，过滤后冷冻干燥，得到奥利万星粉末。

根据本发明的优选实施例，所述步骤(1)的聚合物微球层析柱的固定相为苯乙烯Uni PS、甲基丙烯酸酯Uni PMM或苯乙烯和甲基丙烯酸酯共聚物Uni PSN或KBsphere PSM为基质的聚合物填料。

根据本发明的优选实施例，所述步骤(1)的柱层析包括上样、洗脱的步骤；其中洗脱是用含有磷酸盐或三氟乙酸TFA的甲醇、乙醇或乙腈水溶液进行梯度洗脱。

根据本发明的优选实施例，在洗脱之前还包括用甲醇、乙醇或乙腈水溶液预洗的步骤，以洗去未反应的原料A82846B。