[发明专利]一种水稻中蛋白质含量的测定方法在审
申请号: | 201711498637.8 | 申请日: | 2017-12-29 |
公开(公告)号: | CN108362689A | 公开(公告)日: | 2018-08-03 |
发明(设计)人: | 刘佳音;张国栋;王克响;修旺珊;孙伟航;米铁柱 | 申请(专利权)人: | 袁米农业科技有限公司 |
主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78 |
代理公司: | 北京华仁联合知识产权代理有限公司 11588 | 代理人: | 李冰 |
地址: | 250000 山东省济南市天桥区*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 蛋白质 水稻 抽样 蛋白质样本 可溶性蛋白 标准曲线 缓冲溶液 均匀抽样 显色反应 盐度处理 影响水稻 稀释 称重 框取 染液 配制 田间 申请 | ||
1.一种水稻中蛋白质含量的测定方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)抽样;
(2)算穗;
(3)称重;
(4)配制浓染液;
(5)准备标准曲线蛋白质样本;
(6)溶于缓冲溶液;
(7)稀释;
(8)显色反应;
(9)计算。
2.根据权利要求1所述水稻中蛋白质含量的测定方法,其特征在于,所述步骤(1)抽样:田间均匀抽样几个点,做一个一平方米的框,在每个点用前述框取一平方米的面积,数出每平方米的穗数,算出每平方米的平均穗数a穗。
3.根据权利要求1所述水稻中蛋白质含量的测定方法,其特征在于,所述步骤(2)算穗:抽取部分稻穗,数出粒数,算出每穗平均粒数b粒。
4.根据权利要求1所述水稻中蛋白质含量的测定方法,其特征在于,所述步骤(3)称重:干燥部分稻谷,用天平称重,算出平均千粒重c克
测得亩产=(a穗*b粒)/1000粒*c克*667平方米/1000。
5.根据权利要求1所述水稻中蛋白质含量的测定方法,其特征在于,所述步骤(4)配制浓染液:将100mg考马斯亮蓝G-250溶于50ml 95%乙醇,加入90~110ml 85%的磷酸,然后,用蒸馏水补充至1000ml,此染液放4℃至少6个月保持稳定。
6.根据权利要求1所述水稻中蛋白质含量的测定方法,其特征在于,所述步骤(5)准备标准曲线蛋白质样本:使用测定抗体作为标准品,在30ug-140ug/100ul之间绘制标准曲线。
7.根据权利要求1所述水稻中蛋白质含量的测定方法,其特征在于,所述步骤(6)溶于缓冲溶液:将待测样本溶于缓冲溶液中,该缓冲溶液应与制作标准曲线的缓冲溶液相同。
8.根据权利要求1所述水稻中蛋白质含量的测定方法,其特征在于,所述步骤(7)稀释:按1∶5用蒸馏水稀释浓染料结合溶液,如出现沉淀,过滤除去。
9.根据权利要求1所述水稻中蛋白质含量的测定方法,其特征在于,所述步骤(8)显色反应:每个样本加5ml稀释的染料结合溶液,作用8~29min;染液与蛋白质结合后,在595nm波长下测定其吸光度。
10.根据权利要求1所述水稻中蛋白质含量的测定方法,其特征在于,所述步骤(9)计算:根据标准曲线计算待测样本的浓度。
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