[发明专利]一种基于脑-肠轴的抗帕金森病药物制备方法及其应用

权利要求书

1.一种抗帕金森病的丁酸杆菌制剂，其特征在于丁酸杆菌制剂的制备方法如下：

(1)种子液制备：挑取单菌落丁酸杆菌(Clostridium butyricum)WZ001，保藏编号为CGMCC No.8808，接种于已灭菌的MRS液体培养基中，37℃，厌氧培养24h，得到种子液；

(2)发酵：将步骤(1)种子液按1％重量比的接种量接入已灭菌后的含有以重量百分比计的蛋白胨1-5％、酵母提取物0.5-5％、葡萄糖1-10％、低聚果糖0.5-2％、硫酸铵0.1％、磷酸二氢钾0.05-0.3％、磷酸氢二钾0.05-0.3％、硫酸锰0.02％、硫酸镁0.02％和氯化钙0.002％，其余为去离子水的液体培养基中，经35℃-37℃静置厌氧发酵24h-48h；

(3)收集菌体：将步骤(2)培养得到的丁酸杆菌(Clostridium butyricum)WZ001发酵液，3000rpm离心5～10min，去掉上清液，得到细菌泥，去离子水2～3次洗涤，制成细菌混悬液，再次用3000rpm离心5～10min，去掉上清液体得沉淀物；

(4)细菌破壁：将步骤(3)得到的沉淀物按1∶5～1∶10加去离子水，在150MPa压力下细胞破碎，得到细胞破壁产物；

(5)洗脱去脂：将在步骤(4)中获得的沉淀物使用乙醇进行反复溶解洗脱，10,000rpm离心15～20min，回收沉淀物，洗脱次数为2～3次，再用去离子水3～5次洗涤，3000rpm离心5～10min，得沉淀物；

(6)成品：将步骤(5)中获得的沉淀物于真空负压状态下冷冻干燥，即可获得纯度达到95％以上的干燥粉末，即得到丁酸杆菌制剂。