[发明专利]用于产生具有二触角N-聚糖的重组糖蛋白的细胞系、使用其的方法及重组糖蛋白

权利要求书

1.细胞系，其经遗传修饰以降低(i)GnTIVa或GnTIVb以及(ii)GnTV的表达。

2.根据权利要求1所述的细胞系，其中所有GnTIVa/b和GnTV的表达被降低。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的细胞系，其中GnTIVa/b和/或GnTV的表达被完全消除。

4.根据权利要求1或权利要求2所述的细胞系，其中所述细胞系还被遗传修饰以过表达β-半乳糖苷α-2,6-唾液酸转移酶1(ST6Gal1)和/或α-2,3-唾液酸转移酶4(ST3Gal4)。

5.根据权利要求1或权利要求2所述的细胞系，其中所述细胞系是昆虫细胞系、禽类细胞系或哺乳动物细胞系。

6.根据权利要求5所述的细胞系，其中所述细胞系是人类细胞系。

7.根据权利要求1或权利要求2所述的细胞系，其中所述细胞系来源于选自以下的细胞系：美洲家鸭细胞、非洲绿猴肾上皮细胞、Madin Darby犬肾细胞、幼仓鼠肾细胞、中国仓鼠卵巢细胞、人肝癌细胞系、人胚胎肾293细胞、人神经元前体细胞、人胚胎成视网膜细胞、骨髓瘤细胞系、CML肿瘤细胞系、杂合HEK293和淋巴瘤细胞，以及人羊水细胞来源的CAP细胞。

8.根据权利要求1或权利要求2所述的细胞系，其中所述细胞系来源于人原代羊水细胞，所述人原代羊水细胞包含编码腺病毒E1和pIX区域的基因产物的至少一种核酸。

9.用于在细胞中表达目标重组糖蛋白的方法，当与在GnTIVa/b和/或GnTV表达不降低的细胞系中表达的相同重组糖蛋白相比时，所述目标重组糖蛋白具有二触角N-聚糖比例显著增加的N-聚糖，所述方法包括以下步骤：

(a)提供权利要求1至8中任一项所述的细胞系；

(b)在所述细胞系中表达所述目标糖蛋白；和

(c)从所述细胞或所述细胞培养物上清液分离所述糖蛋白。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述重组糖蛋白选自：α1-抗胰蛋白酶、肝细胞生长因子、因子VII、因子VIII、因子IX、血管性血友病因子和C1酯酶抑制剂。