[发明专利]β-内酰胺酶变体

权利要求书

1.一种具有β-内酰胺酶活性的多肽，所述多肽包含与SEQ ID NO:1具有至少70％序列同一性的氨基酸序列，所述多肽在位置34以及选自位置22和130的至少一个位置处包含替换，其中所述位置对应于SEQ ID NO:1所示的序列中的所述位置。

2.权利要求1的多肽，其中所述多肽包含：

-位置22和34中的每一处的替换；

-位置34和130中的每一处的替换；或

-位置22、34和130中的每一处的替换。

3.权利要求1或2的多肽，所述多肽包含选自以下的至少一个修饰：

Q22H或Q22N；

Q34R；以及

E130D。

4.权利要求1至3任一项的多肽，其中SEQ ID NO:1的第一个残基被甲硫氨酸残基置换。

5.权利要求1至4任一项的多肽，所述多肽还在其N末端处包含信号肽。

6.权利要求1至5任一项的多肽，所述多肽与SEQ ID NO:1所示的序列相比，在其N末端或C末端处包含截短。

7.权利要求6的多肽，所述多肽包含：

-SEQ ID NO:1的残基237-240的C末端截短；

-SEQ ID NO:1的残基236-240的C末端截短；或

-SEQ ID NO:1的残基235-240的C末端截短。

8.权利要求1至6任一项的多肽，所述多肽包含SEQ ID NO:3至22中的任一项的氨基酸序列或其具有β-内酰胺酶活性的片段，或者由SEQ ID NO:3至22中的任一项的氨基酸序列或其具有β-内酰胺酶活性的片段组成。

9.一种分离的核酸序列，所述分离的核酸序列包含编码权利要求1至8任一项的多肽的核酸序列。

10.一种核酸构建体，所述核酸构建体包含权利要求9的核酸序列，所述核酸序列与一个或多个控制序列可操作地连接，所述控制序列引导所述多肽在合适的表达宿主中表达。

11.一种重组宿主细胞，所述重组宿主细胞包含权利要求10的核酸构建体。

12.一种组合物，所述组合物包含权利要求1至8任一项的多肽。

13.权利要求12的组合物，所述组合物可口服给药并且能够在肠的期望部分中，特别是在空肠、回肠、盲肠或结肠中释放所述多肽。

14.一种多部分试剂盒，所述多部分试剂盒包括用于分开、依次或同时给药的：

(a)权利要求1至8任一项的多肽或权利要求12至13任一项的组合物；以及

(b)对(a)的所述多肽或(a)的所述组合物中含有的所述多肽敏感的β-内酰胺抗生素。

15.权利要求1至8的多肽，所述多肽用作药物。

16.权利要求1至8任一项的多肽、权利要求12至13任一项的组合物、权利要求14的多部分试剂盒或权利要求11的重组宿主细胞，其用于在有需要的受试者中使β-内酰胺抗生素失活的方法中或用于治疗由对β-内酰胺抗生素敏感的细菌所引起的细菌感染的方法中。

17.权利要求1至8任一项的多肽、权利要求12至13任一项的组合物、权利要求14的多部分试剂盒或权利要求11的宿主细胞，其用于治疗细菌感染的方法中，其中所述多肽或所述组合物或所述宿主细胞用于与对所述多肽敏感的β-内酰胺抗生素组合使用。