[发明专利]由人多能干细胞衍生的内分泌祖细胞生成功能性β细胞在审
| 申请号： | 201780013255.3 | 申请日： | 2017-02-24 |
| 公开（公告）号： | CN108699515A | 公开（公告）日： | 2018-10-23 |
| 发明（设计）人： | N.S.克里斯特弗森;U.多恩;M.汉森 | 申请（专利权）人： | 诺和诺德股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 李唐;罗文锋 |
| 地址： | 丹麦*** | 国省代码： | 丹麦;DK |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 功能性β细胞 多能干细胞 内分泌 祖细胞 细胞 | ||
1.由人多能干细胞衍生的内分泌祖细胞生成功能性成熟β细胞的方法，其包括以下步骤：(1)在基础培养基中包含组蛋白甲基转移酶EZH2抑制剂、TGF-β信号通路抑制剂、肝素和烟酰胺的培养基中培养干细胞衍生的内分泌祖细胞，以获得INS+和NKX6.1+双阳性未成熟β细胞，以及(2)用12％KOSR和GABA培养在步骤(1)中获得的β细胞以获得功能性成熟β细胞。
2.根据权利要求1所述的由人多能干细胞衍生的内分泌祖细胞生成功能性成熟β细胞的方法，其中组蛋白甲基转移酶EZH2抑制剂为3-去氮腺嘌呤A(DZNep)。
3.根据权利要求1所述的由人多能干细胞衍生的内分泌祖细胞生成功能性成熟β细胞的方法，其中TGF-β信号通路抑制剂为Alk5iII。
4.根据权利要求1所述的由人多能干细胞衍生的内分泌祖细胞生成功能性成熟β细胞的方法，其包括与选自γ-分泌酶抑制剂、cAMP升高剂、甲状腺激素信号通路激活剂及其组合的一种或多种附加剂组合的步骤(1)。
5.根据权利要求4所述的由人多能干细胞衍生的内分泌祖细胞生成功能性成熟β细胞的方法，其中γ-分泌酶抑制剂为DAPT。
6.根据权利要求4所述的由人多能干细胞衍生的内分泌祖细胞生成功能性成熟β细胞的方法，其中cAMP升高剂为dbcAMP。
7.根据权利要求4所述的由人多能干细胞衍生的内分泌祖细胞生成功能性成熟β细胞的方法，其中甲状腺激素信号通路激活剂为T3。
8.根据权利要求4所述的由人多能干细胞衍生的内分泌祖细胞生成功能性成熟β细胞的方法，其中所述附加剂为与T3组合的DAPT。
9.根据权利要求4所述的由人多能干细胞衍生的内分泌祖细胞生成功能性成熟β细胞的方法，其中所述附加剂为与dbcAMP组合的DAPT。
10.根据权利要求1所述的由人多能干细胞衍生的内分泌祖细胞生成功能性成熟β细胞的方法，其包括用与一种或多种附加剂组合的12％KOSR+GABA培养步骤(1)中获得的β细胞，以获得功能性成熟β细胞。
11.根据权利要求10所述的由人多能干细胞衍生的内分泌祖细胞生成功能性成熟β细胞的方法，其中附加剂为Alk5iII。
12.根据权利要求10所述的由人多能干细胞衍生的内分泌祖细胞生成功能性成熟β细胞的方法，其中附加剂为T3。
13.根据权利要求10所述的由人多能干细胞衍生的内分泌祖细胞生成功能性成熟β细胞的方法，其中附加剂Alk5iII与T3组合。
14.能通过根据权利要求1-13所述的方法获得的功能性成熟β细胞。
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