[发明专利]用于治疗神经疾病的方法和组合物

权利要求书

1.一种减少或预防患有I型粘多糖贮积病(MPS I)或I型粘多糖贮积病(MPS II)的受试者的中枢神经系统(CNS)损伤的方法，所述方法包括：

向所述受试者施用无启动子供体载体，其包含编码人α-L-艾杜糖醛酸酶(hIDUA)或人艾杜糖醛酸-2-硫酸酯酶(hIDS)的转基因；以及

施用编码靶向内源白蛋白基因的一对锌指核酸酶(ZFN)的表达载体，

其中所述转基因在裂解肝细胞中的白蛋白基因后整合到所述白蛋白基因中，使得编码的hIDUA或hIDS由肝脏表达和分泌，并且进一步地，其中由所述肝脏分泌的所述hIDUA或hIDS在所述受试者的中枢神经系统(CNS)中发现，使得所述CNS损伤可被减少或预防。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述CNS损伤包含认知缺陷。

3.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其还包括在施用所述供体载体和所述表达载体之前和之后向所述受试者施用免疫抑制剂。

4.如权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述转基因的表达调节所述受试者脑中糖胺聚糖的水平。

5.如权利要求1至4中任一项所述的方法，其中减少或消除所述受试者中的神经元或神经胶质空泡化。

6.如权利要求5所述的方法，其中所述受试者中的神经元或神经胶质细胞空泡化减少或消除了所述受试者脊髓中的细胞活性。

7.如权利要求1至6中任一项所述的方法，其中与未治疗的个体相比，学习能力的丧失降低了。

8.如权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述ZFN对包含表1中所示的锌指蛋白。

9.如权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述ZFN表达载体和所述供体载体包含腺相关载体(AAV)。

10.如权利要求9所述的方法，其中所述ZFN表达载体和所述供体载体AAV通过静脉内注射施用。

11.如权利要求1至10中任一项所述的方法，其中向所述受试者施用的ZFN:ZFN:供体比率是1:1:8。

12.一种Hep2G细胞，其包含编码整合到白蛋白基因的内含子1中的hIUDA或hIDS的无启动子供体载体，其中所述hIUDA或hIDS由所述Hep2G细胞表达和分泌。

13.一种包含如权利要求12所述的Hep2G细胞的细胞培养物，其中培养基包含hIUDA或hIDS。

14.一种药物组合物，其包含由根据权利要求12所述的细胞分泌的hIUDA和/或hIDS或根据权利要求13所述的细胞培养物。

15.一种向有需要的受试者提供hIUDA或hIDS蛋白的方法，所述方法包括向所述受试者施用根据权利要求14所述的药物组合物。