[发明专利]用于治疗神经疾病的方法和组合物

说明书

核酸酶和使用这些核酸酶将编码治疗性IDUA或IDS蛋白诸如酶的序列插入细胞中的方法，从而提供用于治疗和/或预防MPS I或MPS II疾病的蛋白质或细胞治疗剂。

相关申请的交叉引用

本申请要求2016年1月15日提交的美国临时申请号62/279,394；2016年2月26日提交的美国临时号62/300,271；和2016年4月28日提交的美国临时号62/328,925的权益，其公开内容据此全文以引用方式并入。

技术领域

本公开涉及神经疾病，并且尤其是具有中枢神经系统障碍的溶酶体疾病，并且包括I型粘多糖贮积病(MPS I)，和“减毒形式”诸如Scheie综合征(MPS IS)和Hurler-Scheie综合征(MPS H-S)，以及更快速进展形式Hurler综合征(MPS IH)和II型粘多糖贮积病(MPSII)两者，也称为Hunter综合征的治疗以及基因疗法的领域。

背景技术

基因疗法为人类治疗的新时代提供了巨大的潜力。这些方法将允许治疗迄今为止尚未通过标准医学实践解决的病状。特别有希望的一个领域是能够将转基因添加到细胞中以使所述细胞表达先前未在所述细胞中产生的产物。此技术的用途的实例包括插入编码治疗性蛋白的基因、插入编码细胞或个体中某种程度上缺少的蛋白质的编码序列以及插入编码结构核酸诸如微RNA中的序列。

转基因可通过多种方式递送至细胞，使得转基因整合到细胞自身的基因组中并维持在那里。近年来，已开发了转基因整合策略，其使用用位点特异性核酸酶进行的裂解以便靶向插入选择的基因组基因座中(参见例如，共同拥有的美国专利7,888,121)。核酸酶，诸如锌指核酸酶(ZFN)、转录激活因子样效应子核酸酶(TALEN)或核酸酶系统诸如CRISPR/Cas系统(利用工程化指导RNA)对靶基因具有特异性，并且可被利用使得通过同源定向修复(HDR)或通过非同源末端连接(NHEJ)驱动过程中的末端捕获插入转基因构建体。参见例如，美国专利号9,394,531；9,255,250；9,200,266；9,045,763；9,005,973；9,150,847；8,956,828；8,945,868；8,703,489；8,586,526；6,534,261；6,599,692；6,503,717；6,689,558；7,067,317；7,262,054；7,888,121；7,972,854；7,914,796；7,951,925；8,110,379；8,409,861；美国专利公布20030232410；20050208489；20050026157；20050064474；20060063231；20080159996；201000218264；20120017290；20110265198；20130137104；20130122591；20130177983；20130196373；20150056705和20150335708，所述专利的公开内容以引用方式全文并入。

靶基因座包括“安全港”基因座，诸如人细胞中的AAVS1、HPRT、白蛋白和CCR5基因，以及鼠细胞中的Rosa26。参见例如，美国专利号9,394,545；9,222,105；9,150,847；8,895,264；8,771,985；8,110,379；7,951,925；美国公布号20100218264；20110265198；20150056705和20150159172。与依赖于转基因随机整合的经典整合方法相比，核酸酶介导的整合提供了改善转基因表达、增加安全性和表达耐久性的前景，因为它允许精确的转基因定位以使基因沉默或激活附近癌基因的风险最小化，这进而允许提供用于治疗和/或预防疾病的蛋白质。

虽然将转基因递送至靶细胞是完全实施此技术必须克服的一个障碍，但必须攻克的另一个问题是确保在将转基因插入细胞并表达后，如此编码的基因产物必须达到有机体的必要位置，并在足够的局部浓度下使其有效。对于特征在于缺少蛋白质或存在异常非功能性蛋白质的疾病，转基因编码的野生型蛋白质的递送可能是极其有帮助的。