[发明专利]治疗性膜囊泡

说明书

本发明涉及一种从细胞外囊泡或细胞器中产生膜囊泡的方法和通过此类方法产生的治疗性膜囊泡。本发明进一步涉及治疗性膜囊泡、通过使用此类囊泡治疗代谢紊乱的方法和用于治疗，如用于治疗代谢紊乱的此类囊泡。本发明进一步涉及从细胞器中产生膜囊泡的方法。此外，本发明涉及从细胞外囊泡体中分离细胞外囊泡亚群的方法。

技术领域

本发明涉及膜囊泡的产生的领域，具体地说是治疗性膜囊泡的产生。此外，本发明涉及此类膜囊泡用于靶向递送治疗性化合物的治疗用途。

背景技术

已知外泌体(exosome)、核外颗粒体(ectosome)、微囊泡和凋亡小体等细胞外囊泡由人体内的许多细胞释放，并且可以将功能性RNA分子以及蛋白质穿梭至其它细胞。通过脂质膜双分子层保护这些细胞外囊泡的负荷(cargo)免受细胞外酶和免疫系统的影响。先前已经提出，细胞外囊泡如外泌体可以用于将功能性分子包括治疗性核苷酸递送至患病细胞，如癌细胞、癌组织和炎性细胞。

已经提出几种技术用于加载外泌体或微囊泡，用例如用于递送到受体细胞内部的治疗性RNA负荷(Alvarez-Erviti L.等，《自然生物技术(Nat Biotechnol.)》2011年4月；29(4)：341-5；Ohno S.等，《分子治疗(Mol Ther.)》2013年1月；21(1)：185-91；EP2010663)。所有这些技术的共同点是其利用相对“完整”的囊泡。可以认为囊泡是完整的，因为除了其已经加载有的任何特异性负荷例如siRNA或微小RNA(microRNA)以外，所述囊泡携带其通常携带的分子。

虽然此前已经做了很多工作，但细胞外囊泡领域尚未完全探索。此类囊泡的全部治疗性潜力仍有待实现。

发明内容

本公开的目的是提供可以用于靶向递送治疗性化合物的新型治疗性膜囊泡。另一目的是在治疗中使用如此提供的囊泡。

本公开的目的是提供可以用于靶向递送治疗性化合物的新型治疗性膜囊泡。另一目的是在治疗中使用如此提供的囊泡。

本公开的目的是提供产生膜囊泡包括用于治疗用途的那些膜囊泡的新方法。此类方法尤其包括分离特异性膜囊泡和提供具有预定分子含量的膜囊泡的方法。

对技术人员而言从本公开中显而易见的这些和其它目的以如所附权利要求书中要求保护的和如本文一般性公开的本发明的不同方面的方式得到满足。

如本文所用，术语“细胞外囊泡”是指包含包围内部空间的膜的细胞衍生的囊泡。细胞外囊泡包含所有膜结合的囊泡，其直径小于衍生其的细胞的直径。通常，细胞外囊泡的直径在20nm至1000nm范围内，并且可以包含在内部空间内显示在细胞外囊泡的外表面上的和/或跨越膜的各种大分子负荷。所述负荷可以包含核酸、蛋白质、碳水化合物、脂质、小分子和/或其组合。作为实例而非限制，细胞外囊泡包括凋亡小体、细胞碎片、通过直接或间接操作(例如，通过连续挤出或用碱性溶液处理)衍生自细胞的囊泡、囊泡化细胞器和由活细胞产生的囊泡(例如，通过直接质膜出芽或晚期内体与质膜融合)。细胞外囊泡可以衍生自活的或死的生物体、外植的组织或器官和/或培养的细胞。