[发明专利]氨基酸定量方法和氨基酸定量用试剂盒有效
| 申请号： | 201780021302.9 | 申请日： | 2017-03-28 |
| 公开（公告）号： | CN109073590B | 公开（公告）日： | 2021-10-29 |
| 发明（设计）人： | 中柄朋子;青木秀之;喜田干子;山田健太;金子昌二;钉宫章光 | 申请（专利权）人： | 池田食研株式会社;公立大学法人广岛市立大学 |
| 主分类号： | G01N27/416 | 分类号： | G01N27/416;G01N33/68 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 张桂霞;黄希贵 |
| 地址： | 日本*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 氨基酸 定量 方法 试剂盒 | ||
1.样品中的氨基酸定量方法，包括步骤(I)以及步骤(II)，其中所述步骤(I)包括以下各步骤：
步骤I-1，该步骤包括下述反应1：在二价离子或者多元胺的存在下，使样品中的L型和/或D型氨基酸、该氨基酸所对应的氨酰tRNA合成酶和腺苷三磷酸反应，形成包含氨酰腺苷酸和上述氨酰tRNA合成酶的复合体；
步骤I-2，该步骤包括下述反应2：使反应1中形成的复合体与核苷酸反应，使上述氨酰tRNA合成酶和氨基酸从该复合体中游离；
步骤I-3，该步骤包括下述反应3：通过将反应2中游离的上述氨酰tRNA合成酶和氨基酸在反应1中进行再利用，形成包含氨酰腺苷酸和上述氨酰tRNA合成酶的复合体；以及
步骤I-4，重复步骤I-2和步骤I-3的步骤；
所述步骤(II)包括：测定步骤(I)中产生的反应产物的量，根据该反应产物的测定量确定L型和/或D型氨基酸的量，
其中，在重复的步骤I-2中，使反应1和/或反应3中形成的复合体与核苷酸反应，使上述氨酰tRNA合成酶和氨基酸从该复合体中游离，
测定步骤(I)中产生的作为反应产物的焦磷酸或者氢离子的至少任一种，
步骤(I)中产生的反应产物的摩尔数比样品中的氨基酸的摩尔数多。
2.权利要求1所述的氨基酸定量方法，该方法通过使用离子敏感场效应晶体管、玻璃电极膜或者多电极电位测量仪测定电位变化，从而测定步骤(I)中产生的反应产物的量。
3.权利要求1所述的氨基酸定量方法，该方法通过利用吸光度法测定吸光度变化，从而测定步骤(I)中产生的反应产物的量。
4.权利要求1～3中任一项所述的氨基酸定量方法，其特征在于：作为前处理，除去样品中的L型或者D型氨基酸的任意一者。
5.氨基酸定量用试剂盒，其用于实施权利要求1～4中任一项所述的氨基酸定量方法，该试剂盒包含腺苷三磷酸、核苷酸和该氨基酸所对应的氨酰tRNA合成酶。
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