[发明专利]非破坏性种子基因分型

权利要求书

1.从包含小粒谷物种子的群体分离核酸和/或分析包含小粒谷物种子的群体的方法，包括步骤

a.通过至少部分移除谷物种子珠孔端对侧的种子端，暴露所述群体的至少一个单粒种子的胚乳；

b.将种子在水溶液中温育足以允许核酸从种子释放的时间量，因而形成包含核酸的溶液，所述水溶液包含果胶酶、纤维素酶、木聚糖酶、淀粉酶和脂肪酶；

c.任选地从浸泡的溶液浓缩、扩增和/或纯化核酸；

d.任选地分析所述溶液或所述核酸以检测目的核酸的存在。

2.根据权利要求1所述的方法，其中将所述种子群体分选成其中可以检测到或检测不到所述目的核酸的种子亚群。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中根据所述目的核酸的纯合、半合子、杂合或不成对出现，将所述群体分选成种子亚群。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述目的核酸是DNA。

5.根据权利要求3所述的方法，其中所述目的核酸是DNA。

6.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述目的核酸是父方DNA。

7.根据权利要求3所述的方法，其中所述目的核酸是父方DNA。

8.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述目的核酸是母方DNA。

9.根据权利要求3所述的方法，其中所述目的核酸是母方DNA。

10.根据权利要求1、2、5、7和9中任一项所述的方法，其中所述的溶液中温育时间在15分钟至4小时之间。

11.根据权利要求3所述的方法，其中所述的溶液中温育时间在15分钟至4小时之间。

12.根据权利要求4所述的方法，其中所述的溶液中温育时间在15分钟至4小时之间。

13.根据权利要求6所述的方法，其中所述的溶液中温育时间在15分钟至4小时之间。

14.据权利要求8所述的方法，其中所述的溶液中温育时间在15分钟至4小时之间。

15.根据权利要求1、2、5、7、9和11-14中任一项所述的方法，其中所述的溶液中温育时间在30分钟至2小时之间。

16.根据权利要求3所述的方法，其中所述的溶液中温育时间在30分钟至2小时之间。

17.根据权利要求4所述的方法，其中所述的溶液中温育时间在30分钟至2小时之间。

18.根据权利要求6所述的方法，其中所述的溶液中温育时间在30分钟至2小时之间。

19.根据权利要求8所述的方法，其中所述的溶液中温育时间在30分钟至2小时之间。

20.根据权利要求10所述的方法，其中所述的溶液中温育时间在30分钟至2小时之间。

21.根据权利要求1、2、5、7、9、11-14、16-20中任一项所述的方法，其中种子的珠孔端覆以保护涂层。

22.根据权利要求3所述的方法，其中种子的珠孔端覆以保护涂层。

23.根据权利要求4所述的方法，其中种子的珠孔端覆以保护涂层。