[发明专利]糖化血红蛋白的测定方法及糖化血红蛋白测定装置

说明书

本发明的目的在于，在利用阳离子交换色谱测定含有异常血红蛋白D、异常血红蛋白S或异常血红蛋白C的血液样本的情况下，排除该异常血红蛋白带来的影响，得到反映提供血液样本的受试者的症状的SA1c测定结果。本发明通过SA1c的比例(％)的测定方法来解决上述课题，该方法的特征在于，在鉴定来自异常血红蛋白D、异常血红蛋白S或异常血红蛋白C的峰的情况下，计算出该峰的面积，使用该计算结果测定校正后的SA1c的比例(％)。

技术领域

本发明涉及通过液相色谱法测定血液样本中的糖化血红蛋白的方法和装置，具体涉及对于可能混合存在含有异常血红蛋白的血液样本的血液样本组能够实施作为糖尿病诊断指标的糖化血红蛋白的测定的糖化血红蛋白的测定方法和测定装置。

背景技术

血红蛋白具有由2个α链及2个β链构成的α2β2结构，除了占总血红蛋白约97％的血红蛋白A以外，由血红蛋白F、血红蛋白A2构成，所述血红蛋白F具有由2个α链及2个γ链构成的α2γ2结构、且占总血红蛋白的不足 1％，所述血红蛋白A2具有由2个α链及2个δ链构成的α2δ2结构、且占总血红蛋白的不足1％。

血红蛋白与存在于血中的糖(血糖)、其代谢物非酶促地结合(糖化)而形成糖化血红蛋白。占总血红蛋白的大半的血红蛋白A糖化而成的血红蛋白A1 严格来说并不是糖化血红蛋白的全部，但在临床上多作为与糖化血红蛋白相同含义处理。血红蛋白A1可以进一步分离为A1a、A1b、A1c，不受饮食等引起的临时性血糖值上升的影响、反映过去2～3个月的血糖值变化而使浓度发生变化的、所谓的稳定型的血红蛋白A1c(以下，有时简称为“sA1c”)相对于总血红蛋白的比例(以下，有时简称为“A1c％”)被广泛用作糖尿病的诊断、糖尿病患者的随访指标。

糖化血红蛋白的测定以往通过液相色谱法的方法来实施。对于利用液相色谱法进行的糖化血红蛋白的测定而言，大致分为以下方法：使用固定有离子交换物质的填充材料，利用电荷不同将各种血红蛋白分级进行测定的利用阳离子交换色谱的测定方法；使用固定有对糖的亲和性高的氨基苯硼酸基的填充材料的基于亲和色谱的测定方法。基于亲和色谱的测定方法利用对于糖链部分的亲和性，因此可测定包含sA1c的各种糖化血红蛋白(非专利文献2)，在该情况下也利用糖化血红蛋白相对于总血红蛋白的比例。另一方面，在基于阳离子交换色谱的测定方法中，可以在分离各种血红蛋白的基础上，仅测定sA1c来计算相对于总血红蛋白的比例A1c％。

血红蛋白中也存在因血红蛋白基因发生突变而产生的血红蛋白E、血红蛋白D、血红蛋白S、血红蛋白C等各种异常血红蛋白。而且，近年来报告了以下情况(非专利文献1～3)：虽然稀少，但在应实施糖化血红蛋白测定的血液样本含有上述基因突变的结果产生的各种异常血红蛋白的情况下，在基于亲和色谱的测定方法中，可以得到反映提供血液样本的受试者的症状的测定结果，另一方面，在基于阳离子色谱的测定方法中，sA1c％测定值显示出很低的值，有时难以反映提供血液样本的受试者的症状。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开平9-264889号公报

非专利文献

非专利文献1：R.R.Little and W.L.Roberts，J Diabetes Sci Technol，Vol 3(3)，446-451(2009).

非专利文献2：R.R.Little et al.，Clin Chem，Vol 54(8)，1277-1282(2008).

非专利文献3：L.Bry et al.，Clin Chem，Vol 47(2)，153-163(2001).

发明内容

发明要解决的课题