[发明专利]幼年期藤壶的冷冻保存

说明书

本发明涉及一种用于冷冻保存藤壶的卵、无节幼体和幼年藤壶的方法。此外，本发明涉及冷冻保存的饲料以及保存的生物体作为海洋水产养殖中的活饲料生物体的用途，典型地用于代替轮虫和卤虫及其他生命饲料生物体。

技术领域

本发明涉及一种根据权利要求1的前序部分的大规模冷冻保存藤壶的卵、无节幼体和/或幼年的方法。本发明还涉及一种用于复苏冷冻保存的生物体的方法。此外，本发明涉及一种冷冻保存的产品或饲料、及用途。

背景技术

海鱼幼体当开始喂养时是早熟的并且很大程度上取决于作为它们的第一膳食的生命饲料生物体。发现人工膳食如干饲料膳食是次佳的并且当在海鱼幼体的初始阶段作为膳食使用时常常造成高死亡率和生长减慢。对于初始喂养期中人工膳食的这种失败存在几种原因。除此之外，这种失败的主要原因一般是非生命食饵物品的较低摄取率和降低的消化率，以及饲料物品的营养价值的损失和在水中的更高有机负荷。海鱼幼体的初始喂养因此在很大程度上取决于活食饵的供应，这必须在野外捕捉或培养用于该目的。在海鱼幼体的初始喂养中使用的最常见的生物体是丰年虾(Artemia franciscana)及臂尾轮虫(Brachionus sp.)的不同品系。这些生物体通常在水产养殖地点培养并且作为活食饵直接喂食。尽管广泛地用于此目的，但这些生物体的营养价值作为对海鱼幼体的最佳生长、发育和存活的支持是次优的。虽然已经开发了不同的富集技术来提高它们的营养价值，如采用具有高ω-3脂肪酸含量的海洋生物油，但它们的食用价值与基于野外捕捉的食饵的膳食相比仍被认为是次优的，通常导致更高的死亡率、减慢的生长且在很多情况下不良的发育。此外，它们的培养和富集是繁重且成本密集的。

冷水海鱼幼体的天然膳食通常是在不同的阶段的挠足动物的无节幼体和早期桡足幼体，如纺锤水蚤属(Acartia)、飞马哲水蚤(Calanus finnmarchicus)等。在初始喂养中使用挠足动物产生相当的高生长速率和良好的存活。由于挠足动物被认为是最优膳食，所以已作出努力来提高它们的可获得性。出于初始喂养目的使用挠足动物的一个挑战在于野生捕捉仅在一年中当海中这些生物体大量繁殖时的某些特定时期可能实现。此外，它们必须立即使用，因为难以储存活的食饵。近来，已经开发了培养挠足动物的技术，但保存技术(特别是针对生长中的生物体)仍然是一项挑战。

因此，对在海鱼幼体的初始喂养中的替代性活食饵膳食存在极大需求。具体地说，对活的饲料膳食存在需求，这种膳食不依赖于食饵生物体的现场培养或季节依赖性野生捕捉。此外，由于海中有限的鱼类资源及全世界范围对高质量海洋原材料需求的不断增长，特别是对于海洋动物脂质，所以通常需要利用海中除鱼外的其他资源，尤其是在较低营养级上的那些生物体，如浮游生物和未开发的海洋无脊椎动物。为了这些资源的有效利用，需要开发新的方法和技术。

冷冻保存是使用极低的温度来保存结构上完整的活细胞和组织以及生物体。其利用降低温度的有利影响来抑制分子运动并阻止代谢和生化反应。需要特殊的工序来利用低温的保护作用并且以冷冻保存形式成功地储存细胞、组织或生物体更长的一段时间。

冷冻保存方法在不引起由冷冻期间的冰形成所致的损伤的情况下达到低温。一个重要问题是保存的细胞和生物体的随后复苏的有效性。

在此领域中的大多数研究涉及细胞、组织、配子(精子)和胚胎的冷冻保存，它们大都具有医学和农业重要性，包括哺乳动物以及非哺乳类脊椎动物和无脊椎动物。

冷冻保存方法一般是基于两种不同技术，即受控缓慢冷冻技术和极快冷冻技术(玻璃化技术)，如在液氮中。冷冻保护剂在保存过程中的应用将减少可能在冷冻保护期间出现的负面效应，如溶解作用、胞外冰形成、脱水和胞内冰形成。