[发明专利]类器官培养用细胞培养基、培养方法及类器官

权利要求书

1.一种上皮类器官培养用细胞培养基，所述培养基用于培养上皮干细胞或上皮细胞或上皮肿瘤细胞、或者包含这些细胞中的至少任一种的组织，其特征在于，所述培养基包含选自胰岛素样生长因子1(IGF1)、成纤维细胞生长因子2(FGF2)、及表皮调节素(EREG)的至少2种以及骨形态发生蛋白(BMP)抑制剂和转化生长因子-β(TGF-β)抑制剂和任选的Wnt激动剂；并且，所述细胞培养基中实质上不含EGF和p38抑制剂。

2.根据权利要求1所述的上皮类器官培养用细胞培养基，其中包含所述BMP抑制剂、TGF-β抑制剂和Wnt激动剂。

3.根据权利要求1或2所述的上皮类器官培养用细胞培养基，其中，包含IGF1及FGF2。

4.根据权利要求1或2所述的上皮类器官培养用细胞培养基，其中，所述Wnt激动剂是选自Wnt蛋白、R-海绵硬蛋白、及GSK-3β抑制剂的至少1种。

5.根据权利要求4所述的上皮类器官培养用细胞培养基，其中，所述Wnt蛋白与阿法敏形成复合物。

6.根据权利要求4所述的上皮类器官培养用细胞培养基，其中，所述Wnt激动剂为Wnt蛋白及R-海绵硬蛋白。

7.根据权利要求4所述的上皮类器官培养用细胞培养基，其中，所述Wnt蛋白为选自Wnt1、Wnt2、Wnt2b、Wnt3、Wnt3a、Wnt4、Wnt5a、Wnt5b、Wnt6、Wnt7a、Wnt7b、Wnt8a、Wnt8b、Wnt9a、Wnt9b、Wnt10a、Wnt10b、Wnt11、及Wnt16的至少1种。

8.根据权利要求4所述的上皮类器官培养用细胞培养基，其中，所述R-海绵硬蛋白是选自R-海绵硬蛋白1、R-海绵硬蛋白2、R-海绵硬蛋白3、及R-海绵硬蛋白4的至少1种。

9.根据权利要求1或2所述的上皮类器官培养用细胞培养基，其中，所述BMP抑制剂是选自包括头蛋白、格雷林、腱蛋白、腱蛋白结构域的腱蛋白样蛋白，包括卵泡抑素、卵泡抑素结构域的卵泡抑素相关蛋白，包括DAN、DAN半胱氨酸结构域的DAN样蛋白，硬骨素/SOST、及α2-巨球蛋白的至少1种。

10.根据权利要求9所述的上皮类器官培养用细胞培养基，其中，所述BMP抑制剂为头蛋白。

11.根据权利要求1或2所述的上皮类器官培养用细胞培养基，其中，所述TGF-β抑制剂是选自A83-01、SB-431542、SB-505124、SB-525334、SD-208、LY-36494、及SJN-2511的至少1种。

12.根据权利要求11所述的上皮类器官培养用细胞培养基，其中，所述TGF-β抑制剂为A83-01。