[发明专利]用于蛋白生产的脂质代谢的调节

权利要求书

1.一种用于通过细胞生产产品，例如，多肽，如重组多肽的方法，所述方法包括：

i)提供含有调节脂质代谢的修饰的细胞，以及

ii)培养所述细胞，例如，在适于通过所述修饰调节脂质代谢的条件下，

从而生产所述产品，例如，多肽，例如重组多肽。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述细胞包含编码所述多肽，例如，选自表2或表3的多肽的外源性核酸。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中与不具有所述修饰的细胞相比，所述修饰为所述多肽提供了增加的产量或改善的质量。

4.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，包括在所述细胞中形成编码脂质代谢调节剂(LMM)的外源性核酸或外源性LMM，以及任选地其中形成包括引入编码脂质代谢调节剂的外源性核酸，例如，其增加编码LMM的内源性核酸的表达。

5.根据权利要求1-4中任意一项所述的方法，包括调节脂质代谢的第二修饰并且其中所述第二修饰包含编码第二LMM，例如，与所述第一修饰的所述LMM不同的LMM的第二外源性核酸。

6.根据权利要求5所述的方法，其中：

i)将所述第二外源性核酸和所述第一外源性核酸置于同一核酸分子上，或者

ii)将所述第二外源性核酸和所述第一外源性核酸置于不同核酸分子上。

7.根据权利要求5或6所述的方法，其中与不具有所述第二修饰的细胞相比，所述第二修饰为所述产品提供了增加的产量或改善的质量。

8.根据权利要求5-7中任意一项所述的方法，包括在所述细胞中形成编码第二LMM的第二外源性核酸或第二外源性LMM，以及任选地其中形成包括引入编码第二LMM的所述第二外源性核酸，例如，其增加编码LMM的内源性核酸的表达。

9.根据权利要求1-8中任意一项所述的方法，其中调节脂质代谢包括，例如，导致改变以下一种或多种(例如，与不具有修饰的细胞相比)：

i)参与脂质代谢途径的组分的表达(例如，转录和/或翻译)；

ii)参与脂质代谢途径的组分的活性(例如，酶活性)；

iii)在细胞中存在的脂质(例如，磷脂或胆固醇)的量；

iv)脂筏的量或脂筏形成速率；

v)细胞膜(例如，质膜、囊泡膜或细胞器膜)的流动性、渗透性和/或厚度；

vi)饱和脂质向不饱和脂质的转化或不饱和脂质向饱和脂质的转化；

vii)饱和脂质或不饱和脂质，例如，单不饱和脂质的量；

viii)细胞中的脂质组成，以获得对增加ER活性有利的组成；

ix)扩张ER(例如，ER的尺寸、ER膜表面或者构成和/或驻留在ER内的蛋白和脂质的量)；

x)扩张高尔基体(例如，高尔基体的数目和尺寸、高尔基体表面或者驻留在高尔基体内的蛋白和分子的数目或量)；

xi)分泌囊泡的量或分泌囊泡的形成；

xii)产品分泌的量或速率；

xiii)增殖能力，例如，增殖速率；

xiv)培养活力或细胞存活；

xv)膜受体活化；

xvi)未折叠蛋白应答(UPR)；

xvii)产品的产率或生产速率；

xviii)产品质量(例如，聚集、糖基化、异质性、片段化、正确折叠或组装、翻译后修饰或二硫键错配(scrambling))；和/或

xix)细胞生长/增殖或细胞特异性生长速率。

10.根据权利要求1-9中任意一项所述的方法，其中：

i)例如，与无所述脂质代谢修饰的细胞生产的产品水平或量相比，所述产品，例如，重组多肽的产量增加1倍、2倍、5倍、10倍、20倍、50倍、100倍，或者

ii)例如，与无所述脂质代谢修饰的细胞生产的产品质量相比，所述产品，例如，重组多肽的质量增加1倍、2倍、5倍、10倍、20倍、50倍、100倍。