[发明专利]CD4CD8双阳性T细胞的制备方法在审
申请号: | 201780039329.0 | 申请日: | 2017-06-21 |
公开(公告)号: | CN109415699A | 公开(公告)日: | 2019-03-01 |
发明(设计)人: | 金子新;安井裕;入口翔一;上田树 | 申请(专利权)人: | 国立大学法人京都大学 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783;C12N5/0735;C12N5/074;C12N5/10 |
代理公司: | 北京坤瑞律师事务所 11494 | 代理人: | 封新琴 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 双阳性 培养液 造血祖细胞 制备 诱导 多能性干细胞 | ||
1.一种制备CD4CD8双阳性T细胞的方法,其包括在含有p38抑制剂和/或SDF-1的培养液中培养造血祖细胞,诱导CD4CD8双阳性T细胞的步骤。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,所述培养液含有p38抑制剂和SDF-1。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其中,所述p38抑制剂为SB203580。
4.根据权利要求1~3中任一项所述的方法,其中,在所述步骤中,培养液含有维生素C类。
5.根据权利要求1~4中任一项所述的方法,其中,所述步骤利用贴壁培养进行。
6.根据权利要求1~5中任一项所述的方法,其中,所述造血祖细胞的培养不使用饲养细胞。
7.根据权利要求1~6中任一项所述的方法,其中,所述造血祖细胞是从多能性干细胞分化诱导而成的造血祖细胞。
8.根据权利要求7所述的方法,其中,多能性干细胞为人工多能性干细胞。
9.根据权利要求8所述的方法,其中,人工多能性干细胞来自T细胞以外的体细胞。
10.根据权利要求8或9所述的方法,其中,人工多能性干细胞为导入了嵌合抗原受体的人工多能性干细胞。
11.一种制备CD4CD8双阳性T细胞的方法,其包括以下步骤:
(1)在培养液中培养多能性干细胞,诱导造血祖细胞的步骤;
(2)在含有p38抑制剂和/或SDF-1的培养液中培养所述步骤(1)中得到的造血祖细胞,诱导CD4CD8双阳性T细胞的步骤。
12.根据权利要求11所述的方法,其中,在所述步骤(2)中,培养液含有p38抑制剂和SDF-1。
13.根据权利要求11或12所述的方法,其中,所述p38抑制剂为SB203580。
14.根据权利要求11~13中任一项所述的方法,其中,所述步骤(1)利用悬浮培养进行。
15.根据权利要求11~14中任一项所述的方法,其中,所述步骤(2)利用贴壁培养进行。
16.根据权利要求11~15中任一项所述的方法,其中,在所述步骤(1)和(2)中,培养液含有维生素C类。
17.根据权利要求11~16中任一项所述的方法,其中,在所述步骤(1)和(2)中,培养不使用饲养细胞。
18.根据权利要求11~17中任一项所述的方法,其中,多能性干细胞为人工多能性干细胞。
19.根据权利要求18所述的方法,其中,人工多能性干细胞来自T细胞以外的体细胞。
20.根据权利要求18或19所述的方法,其中,人工多能性干细胞为导入了嵌合抗原受体的人工多能性干细胞。
21.一种制备CD8阳性T细胞的方法,其包括:
利用权利要求1~20中任一项所述的方法制备CD4CD8双阳性T细胞的步骤、以及将所得到的CD4CD8双阳性T细胞在添加了肾上腺皮质激素剂的培养液中培养而得到CD8阳性T细胞的步骤。
22.细胞制剂,其包含通过权利要求1~20中任一项所述的方法得到的CD4CD8双阳性T细胞和/或通过权利要求21的方法得到的CD8阳性T细胞。
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