[发明专利]辣根过氧化物酶-IGG融合蛋白的制备

权利要求书

1.一种产生融合蛋白的方法，所述融合蛋白包含：

(i)辣根过氧化物酶；

(ii)肽接头；

(iii)scFv；

(iv)内质网滞留信号；以及

(v)组氨酸标签，

其中所述scFv通过所述肽接头连接到所述辣根过氧化物酶，

该方法包括在本塞姆氏烟草叶细胞中表达融合蛋白并从所述本塞姆氏烟草叶细胞中回收所述融合蛋白。

2.一种产生具有下式的融合蛋白的方法：

X₁-X₂-X₃-(X₄)_n-X₅(I)

或者

X₃-X₂-X₁-(X₄)_n-X₅(II)

其中，X₁是辣根过氧化物酶，X₂是肽接头，X₃是scFv，X₄是内质网滞留信号，X₅是组氨酸标签，n是0或1，

该方法包括在本塞姆氏烟草叶细胞中表达融合蛋白并从所述本塞姆氏烟草叶细胞中回收所述融合蛋白。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述辣根过氧化物酶包括N末端内质网靶向序列。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述scFv具有选自抗小鼠、抗驴、抗兔、抗马、抗人、抗鸡、抗山羊或抗绵羊活性的免疫球蛋白结合活性。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述scFv具有抗兔免疫球蛋白结合活性。

6.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述内质网滞留信号选自HDEL、KDEL、SEKDEL或其变体。

7.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述组氨酸标签是6x组氨酸标签。

8.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述融合蛋白进一步包括人IgG1重链恒定区和人IgG1轻链恒定区。