[发明专利]E-选择素配体的糖工程化在审
| 申请号： | 201780043863.9 | 申请日： | 2017-05-22 |
| 公开（公告）号： | CN109983119A | 公开（公告）日： | 2019-07-05 |
| 发明（设计）人： | 罗伯特·萨克斯坦 | 申请（专利权）人： | 罗伯特·萨克斯坦 |
| 主分类号： | C12N5/077 | 分类号： | C12N5/077;C12N5/078;C12N5/0784;C12N5/0797;A61K35/28;A61K35/17;A61P29/00;A61P37/00;A61P9/00;A61P35/00;A61P3/00 |
| 代理公司： | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人： | 张小勇 |
| 地址： | 美国马*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 细胞群 选择素配体 细胞 治疗 损伤 移植 药物组合物 细胞表面 干细胞 工程化 试剂盒 疾病 修饰 诱导 | ||
1.一种增强E-选择素和/或L-选择素配体在细胞表面上的表达的方法，所述方法包括以下步骤：
向细胞提供编码糖基转移酶的核酸，和
在足以表达糖基转移酶的条件下培养细胞，其中表达的糖基转移酶修饰细胞的糖蛋白上存在的末端唾液酸化的乳糖胺以增强E-选择素和/或L-选择素配体的表达。
2.权利要求1的方法，其中糖基转移酶是α1,3-岩藻糖基转移酶。
3.权利要求2的方法，其中α1,3-岩藻糖基转移酶是α1,3-岩藻糖基转移酶FTIII、FTIV、FTV、FTVI、FTVII及其组合。
4.权利要求2的方法，其中糖基转移酶在细胞内修饰末端唾液酸化的乳糖胺。
5.一种使得细胞能够与E-选择素和/或L-选择素结合和/或增加细胞与E-选择素和/或L-选择素的结合的方法，所述方法包括以下步骤：
向细胞提供编码α1,3-岩藻糖基转移酶的核酸，和
在足以通过细胞表达α1,3-岩藻糖基转移酶的条件下培养细胞；
其中α1,3-岩藻糖基转移酶修饰糖蛋白上存在的聚糖链以产生E-选择素和/或L-选择素配体和从而使得细胞能够与E-选择素和/或L-选择素结合和/或增加细胞与E-选择素和/或L-选择素的结合。
6.权利要求5的方法，其中细胞是哺乳动物细胞。
7.权利要求6的方法，其中哺乳动物细胞是人细胞。
8.权利要求5的方法，其中细胞是干细胞。
9.权利要求8的方法，其中干细胞选自胚胎干细胞、成体干细胞、造血干细胞和诱导的多能干细胞(iPSC)。
10.权利要求9的方法，其中成体干细胞是间充质干细胞。
11.权利要求5的方法，其中通过转染将核酸提供给细胞。
12.权利要求5的方法，其中通过转导将核酸提供给细胞。
13.权利要求5的方法，其中核酸选自DNA、RNA、DNA/RNA杂合体、cDNA、mRNA、其修饰形式及其组合。
14.权利要求13的方法，其中核酸是经修饰的RNA。
15.权利要求14的方法，其中经修饰的RNA是modRNA。
16.权利要求5的方法，其中α1,3-岩藻糖基转移酶是人α1,3-岩藻糖基转移酶。
17.权利要求5的方法，其中α1,3-岩藻糖基转移酶是人FTVI。
18.权利要求5的方法，其中α1,3-岩藻糖基转移酶使选自PSGL-1、CD43、CD44及其组合的糖蛋白岩藻糖基化。
19.一种增加被移植入受试者的细胞群的归巢和/或外渗的方法，所述方法包括以下步骤：
向细胞群提供编码α1,3-岩藻糖基转移酶的核酸，
在足以通过细胞群内的一个或多个经修饰的细胞表达α1,3-岩藻糖基转移酶的条件下培养细胞群，其中α1,3-岩藻糖基转移酶使糖蛋白上存在的聚糖链岩藻糖基化以产生其中E-选择素和/或L-选择素配体表达得到增强的经修饰的细胞；和
将细胞群移植入受试者，其中具有增强的E-选择素和/或L-选择素配体表达的经修饰的细胞显示出向治疗上有用的部位的增加的归巢和/或外渗。
20.权利要求19的方法，其中细胞群是哺乳动物细胞群。
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