[发明专利]使用至少两种抗原检测样品中分枝杆菌物质存在的方法

说明书

本发明涉及检测样品中针对分枝杆菌物质存在的方法，其包括检测所述样品中抗体与至少两种类型的固定的抗原的结合，所述抗原能够结合指示人或动物中分枝杆菌物质存在的抗体。固体基质，其包含固定于所述基质的所述至少2个抗原，并本发明还涉及包括至少两种类型的固定的抗原的生物传感器，所述抗原能够结合指示人或动物中分枝杆菌物质存在的抗体。

本发明涉及检测样品中针对分枝杆菌物质存在的方法，其包括检测所述样品中抗体与至少两种类型的固定的抗原的结合，所述抗原能够结合指示人或动物中分枝杆菌物质存在的抗体。本发明还涉及固体基质，其包含固定于所述基质的所述至少2种抗原，并且本发明还涉及包括至少两种类型的固定的抗原的生物传感器，所述抗原能够结合指示人或动物中分枝杆菌物质存在的抗体。

绪论

结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)是分枝杆菌科中一种致病细菌物种并且是大多数结核病(TB)的致病因子。

在许多中低收入国家，TB仍然是主要的致死原因之一。此外，报道了越来越多的多药抗性TB病例。

因此，一种可靠而快速的结核病诊断方法至关重要。

虽然已经开发了几种诊断结核病的方法，但是所有方法都有其缺点。

仅仅基于迹象和症状来诊断结核病是困难的，正如在免疫抑制的人中诊断疾病一样。TB皮肤测试(也称为Mantoux结核菌素皮肤测试)，TB血液检测(也称为干扰素-γ释放试验或IGRA)，和胸部放射线检查(X射线)，以及对唾液涂片上抗酸杆菌(AFB)存在的检测在几天内指示一些感染个体。

唾液涂片显微镜检测(也称为涂片测试)是在大多数TB病例发生的中低收入国家诊断肺结核的常用方法。虽然它是用于很高结核病患病率地区的一种简单、快速和廉价的技术，但是其性能存在很大的局限性。例如，当细菌载量小于10,000个结核分枝杆菌生物体/ml唾液样品时，灵敏度受到严重影响。因此，在涂片测试中检测呈阳性的人(涂片阳性的人)具有非常高的细菌载量，并且将因此处于TB的非常晚期阶段。在涂片阳性的人中，该人患有疾病通常是一目了然的。在如此晚期的阶段，通常不再可能成功治疗。另一方面，如果一个人在涂片测试中呈阴性(涂片阴性的人)，则不能得出结论，因为该人可能患有在较早期阶段的TB，而其与较低的细菌载量相关。在涂片阴性的人中，该人患有疾病通常并非一目了然的。此外，涂片测试在肺外结核、小儿结核病和共同感染HIV和结核病的患者中得到不佳的结果。

感染结核分枝杆菌的人或动物通常产生针对分枝杆菌的抗体。在取自感染个体的样品中存在这些抗体表明感染。最常见的分枝杆菌特异性抗原是分枝菌酸或其衍生物。例如，WO 2005/116654和WO 2013/186679描述了通过检测抗体与固定的分枝菌酸抗原的结合，样品中针对分枝菌酸的抗体的方法，用于诊断活性结核病。

发明人已经在源自健康对象的样品中观察到，当用作抗原的唯一类型时，这些样品中包含的物质与固定的分枝菌酸抗原高度结合，这表明源自健康对象的样品包含与分枝菌酸抗原结合的物质，但其不是结核病的指示。这可能会导致假阳性结果。因此，在对象确实患有结核病的情况下，出现的问题是，如果在检测测试中不是结核病指示的物质与固定的分枝菌酸抗原结合，将会产生高背景结合信号。这种高背景信号可能会掩盖来自结核病的实际标志物的信号。所以，还存在假阴性结果的风险。因此，发明人认为在结核病检测的灵敏度方面存在改进的空间。

因此，本发明旨在克服来自并非结核病指示的物质与固定的分枝菌酸抗原结合的问题并提高结核病检测的灵敏度和可靠性。

发明内容

本发明的目标已经通过提供检测样品中针对分枝杆菌物质的抗体的存在实现，所述方法包括以下步骤：提供来自人或动物的样品；和检测所述样品中抗体与至少两种类型的固定的抗原的结合，所述抗原能够结合指示人或动物中分枝杆菌物质存在的抗体，所述至少两种类型的固定的抗原选自下述：

A)分枝菌酸源性抗原，任选地用一个或多个能够固定于所述固体基质的官能团修饰，