[发明专利]用于测量细胞中离子通道活性的组合物和方法

权利要求书

1.一种用于检测细胞中钾离子通道的活性的方法，其包含：

a)使所述细胞与上样缓冲液接触，其中所述细胞包含钾离子通道，其中所述上样缓冲液包含铊离子指示剂；

b)向所述细胞施加刺激缓冲液，其中所述刺激缓冲液包含铊离子，从而使铊离子通过所述钾离子通道流入所述细胞，所述刺激缓冲液包括浓度使得含有细胞的孔中钾离子的最终浓度在10-150mM范围内的钾盐；和

c)测量响应于铊流入的所述铊离子指示剂的至少一种光学特性的变化，从而检测所述钾离子通道的所述活性，

其中所述铊离子指示剂具有如下所示的结构：

其中R₂＝H，并且R₁＝

其中R₃、R₄独立地是C₁-C₆烷基；

并且

其中R₇是H、CH₃或C₂-C₆烷基或其盐。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述刺激缓冲液包含小于4.5mM的铊离子浓度。

3.根据权利要求1所述的方法，其还包含量化铊离子流入的水平。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述铊离子指示剂的所述至少一种光学特性是极性、频率或光密度。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述至少一种光学特性是发光强度，其中所述方法还包含测量响应于铊离子流入的所述铊离子指示剂的所述发光强度的变化。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述上样缓冲液不含氯化物。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述上样缓冲液还包含生理浓度的氯离子。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述细胞是哺乳动物细胞。

9.根据权利要求1所述的方法，其还包含在使所述细胞与所述上样缓冲液接触后洗涤所述细胞。

10.根据权利要求1所述的方法，其中所述铊离子为盐的形式。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述铊离子能溶于所述上样缓冲液中。

12.根据权利要求10所述的方法，其中所述铊离子是Tl₂SO₄、Tl₂CO₃、TlCl、TlOH、TlOAc或TNNO₃。

13.一种用于检测细胞中钾离子通道的活性的试剂盒，所述试剂盒包含：

上样缓冲溶液，其中所述上样缓冲溶液包含铊离子指示剂；和刺激缓冲液，其中所述刺激缓冲液包含铊离子，并且其中所述刺激缓冲液使铊离子通过所述离子通道流入所述细胞，所述刺激缓冲液包括浓度使得含有细胞的孔中钾离子的最终浓度在10-150mM范围内的钾盐；其中所述铊离子指示剂具有如下所示结构：

其中R₂＝H，并且R₁＝

其中R₃、R₄独立地是C₁-C₆烷基；

并且

其中R₇是H、CH₃或C₂-C₆烷基或其盐。