[发明专利]在丝状真菌细胞中选择性碳源非依赖性表达蛋白质编码序列的方法有效
申请号: | 201780057611.1 | 申请日: | 2017-09-19 |
公开(公告)号: | CN109715809B | 公开(公告)日: | 2023-04-14 |
发明(设计)人: | C·加茂夫;G·施马赫;B·塞博斯;C·P·库比切克;R·比肖弗 | 申请(专利权)人: | 科莱恩产品(德国)公司 |
主分类号: | C12N15/80 | 分类号: | C12N15/80 |
代理公司: | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人: | 陈文平;谢燕军 |
地址: | 德国法*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 丝状 真菌 细胞 选择性 碳源 依赖性 表达 蛋白质 编码 序列 方法 | ||
1.一种在丝状真菌细胞中选择性启动表达蛋白质编码序列的方法,所述启动非依赖于丝状真菌生长所用碳源,所述方法包括以下步骤:
a)向所述丝状真菌细胞中引入序列如SEQ ID NO:3所示的启动子;
b)使含有所述启动子的所述丝状真菌细胞与生长培养基接触;
c)向所述生长培养基添加泛酸以启动所述蛋白质编码序列的转录。
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述蛋白质为异源蛋白质。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述丝状真菌选自支顶孢菌属(Acremonium)、曲霉属(Aspergillus)、毛壳菌属(Chaetomium)、镰刀菌属(Fusarium)、腐质霉属(Humicola)、耙菌属(Irpex)、巨座殻属(Magnaporte)、毁丝霉属(Myceliophthora)、链孢霉属(Neurospora)、青霉菌属(Penicillium)、根霉属(Rhizopus)、篮状菌属(Talaromyces)、木霉属(Trichoderma)和栓菌属(Trametes)。
4.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述蛋白质编码序列为编码酶或转录因子的序列。
5.根据权利要求4所述的方法,其中所述酶选自由酯酶、水解酶、裂解酶、氧化酶、重组酶、转移酶组成的组。
6.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述启动子在载体内引入。
7.根据权利要求1-6任一项中定义的启动子用于在丝状真菌细胞中选择性表达蛋白质编码序列的用途,其中所述表达的启动非依赖于丝状真菌生长所用碳源。
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