[发明专利]从含有肉毒杆菌毒素的溶液中分离肉毒杆菌毒素的方法有效
| 申请号： | 201780058610.9 | 申请日： | 2017-11-29 |
| 公开（公告）号： | CN110099918B | 公开（公告）日： | 2023-07-28 |
| 发明（设计）人： | 丁贤壕;梁起赫;李彰训;金学祐;柳基赫;洪衡杓;宋晶贤;孔竣燦 | 申请（专利权）人： | 玫帝托克斯股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K1/18 | 分类号： | C07K1/18;C07K14/33;B01D15/36 |
| 代理公司： | 北京市中伦律师事务所 11410 | 代理人： | 杨黎峰;钟锦舜 |
| 地址： | 韩国忠*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 含有 杆菌 毒素 溶液 分离 方法 | ||
1.一种从含有肉毒杆菌毒素的溶液中分离A型肉毒杆菌毒素超大复合物的方法，所述方法包括：
使所述含有肉毒杆菌毒素的溶液与阴离子交换色谱介质在低于肉毒杆菌毒素等电点(PI)的pH下接触；
使所述含有肉毒杆菌毒素的溶液的未与所述阴离子交换色谱介质结合的流通部分与阳离子交换色谱介质在低于肉毒杆菌毒素PI的pH下接触；以及
从所述阳离子交换色谱介质中分离所述A型肉毒杆菌毒素超大复合物；或者
使所述含有肉毒杆菌毒素的溶液与所述阳离子交换介质在低于肉毒杆菌毒素PI的pH下接触；
从所述阳离子交换色谱介质中分离肉毒杆菌毒素；
使包含从所述阳离子交换色谱介质中分离的毒素的溶液与所述阴离子交换介质在低于所述PI的pH下接触；以及
从含有所述毒素的所述溶液的未与所述阴离子交换色谱介质结合的流通部分中分离所述A型肉毒杆菌毒素超大复合物。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述低于肉毒杆菌毒素PI的pH为3.5至6.0。
3.根据权利要求1所述的方法，还包括在使所述溶液与所述阴离子交换色谱介质接触之前、在使所述溶液与所述阳离子交换色谱介质接触之前、或者在这两个过程中的每一者之前，调节所述肉毒杆菌毒素或所述含有肉毒杆菌毒素的溶液使pH低于肉毒杆菌毒素的pI。
4.根据权利要求3所述的方法，其中所述调节包括将所述肉毒杆菌毒素或所述含有肉毒杆菌毒素的溶液与pH低于肉毒杆菌毒素pI的缓冲液混合。
5.根据权利要求4所述的方法，其中所述缓冲液是磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液或乙酸盐缓冲液。
6.根据权利要求4所述的方法，其中所述缓冲液的pH为3.5至6.0。
7.根据权利要求4所述的方法，其中所述缓冲液包含10mM至100mM磷酸盐缓冲液、10mM至100mM柠檬酸盐缓冲液或10mM至100mM乙酸盐缓冲液。
8.根据权利要求1所述的方法，其中所述阴离子交换色谱是DEAE或Q阴离子交换色谱。
9.根据权利要求1所述的方法，其中所述阳离子交换色谱是CM、S或SP阳离子交换色谱。
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