[发明专利]检测每个细胞的PD-L1表达的方法及其用途

说明书

提供了用于检测赘瘤细胞的每个细胞的程序性死亡配体1(PD‑L1)表达的方法。所述方法的方面包括以细胞计数方式测定标记的细胞悬浮液来定量每个细胞的PD‑L1表达，以检测赘瘤样品中是否存在表达高于预定阈值的PD‑L1的赘生性细胞。另外，还提供了可用于实施主题方法的试剂盒。

相关申请的交叉引用

依照35 U.S.C.§119(e)，本申请要求2016年9月6日提交的美国临时专利申请序列号62/384,037的自提交日期的优先权，所述专利申请的公开内容以引用的方式并入本文中。

发明背景

癌症仍然是全球死亡的主要原因之一，据估计全世界每年有1270万例病例使两性同等地受到影响。到2030年，预计这一数字将增至2100万。

免疫系统与肿瘤发展密切相关，在疾病进展至转移期间尤其起到决定性作用。免疫系统对癌症的影响并无严格抑制性，因为免疫性与癌细胞之间的复杂串扰也增强了肿瘤生长。免疫系统涉及到癌症进展中现在一般被视为癌症的标志。因此，免疫系统如何对癌症作出反应决定了最终的结果。即使在受试者的免疫系统确实对癌症产生显著的初始反应的情况下，癌症仍然可能通过各种机制逃避免疫反应的破坏性因素，这些机制包括免疫检查点蛋白的表达以触发免疫抑制。导致逃避免疫攻击的其它机制包括选择对免疫效应物具抗性的肿瘤变体(即，“免疫编辑”)和在肿瘤内逐渐形成免疫抑制环境。

免疫疗法寻求合理地重定向受试者的免疫系统以有效地靶向癌症和/或防止免疫逃避。

发明内容

提供了用于检测赘瘤细胞的每个细胞的程序性死亡配体1(PD-L1)表达的方法。所述方法的方面包括以细胞计数方式测定标记的细胞悬浮液来定量每个细胞的PD-L1表达，以检测赘瘤样品中是否存在表达高于预定阈值的PD-L1的赘生性细胞。另外，还提供了可用于实施主题方法的试剂盒。

附图说明

当结合附图阅读以下详细描述时可最透彻地理解本发明。要强调的是，按照惯例，附图的各种特征不成比例。相反，为清楚起见，各种特征的尺寸任意地放大或缩小。附图中包括以下图式。

图1描绘了使用如本文所描述的PD-L1标记和流式细胞计数分析的PD-L1阳性对照和阴性对照细胞的清晰细胞计数分离。

图2描绘了用掺入阴性对照样品中的各种百分比的PD-L1阳性细胞制备的混合样品中PD-L1阳性细胞检测的线性。

图3描绘了用于如本文所描述的实施方案中使用的每个细胞的PD-L1定量的PD-L1荧光的基于MESF珠粒的标准化。

图4描绘了肿瘤和免疫细胞子组的定量PD-L1表达分析以及源自患者的样品中PD-L1表达细胞的特异性检测的验证。

图5提供了表2。

图6描绘了根据本文所描述的实施方案测定的肺肿瘤组织免疫细胞浸润物的增殖。

图7描绘了根据本文所描述的实施方案测定的肿瘤组织中巨噬细胞的损失和非T细胞的增加。

图8描绘了根据本文所描述的实施方案测定的肿瘤组织中存在的淋巴细胞与二倍体相比非整倍性的增加。

具体实施方式

提供了用于检测赘瘤细胞的每个细胞的程序性死亡配体1(PD-L1)表达的方法。所述方法的方面包括以细胞计数方式测定标记的细胞悬浮液来定量每个细胞的PD-L1表达，以检测赘瘤样品中是否存在表达高于预定阈值的PD-L1的赘生性细胞。另外，还提供了用于实施主题方法的试剂盒。

在描述本发明方法和试剂盒之前，应理解，本发明不限于所描述的特定方法或试剂盒，因此当然可以变化。还应理解，本文所用的术语仅出于描述特定实施方案的目的，并且不意图具有限制性，因为本发明的范围将仅受所附权利要求书限制。