[发明专利]使用单细胞分析进行疾病诊断的组合物和方法

权利要求书

1.一种用于检测和表征样品中的微生物的方法，其包括：

(a)使含有微生物的样品与报道分子接触，形成样品混合物，其中报道分子的特性随微生物代谢的变化而变化；

(b)将样品混合物分成至少一个亚纳升微滴的二维阵列，其中一部分亚纳升微滴具有每微滴一个微生物或一个天然微生物聚集体；

(c)在特定温度或一系列温度下将亚纳升微滴孵育一段时间；

(d)在孵育期间监测亚纳升微滴中的报道分子的光学特性；

(e)构建每个亚纳升微滴的光学发射波形，从而产生亚纳升微滴波形；和

(f)通过亚纳升微滴波形的形状对样品中的微生物进行分类。

2.根据权利要求1所述的方法，其中通过将亚纳升微滴波形与储存的波形库进行比较来对微生物进行分类。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述亚纳升微滴在不互溶流体中。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述不互溶流体是包含氟表面活性剂的氟碳化合物。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述二维阵列是亚纳升微滴单层。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述二维阵列是静态二维阵列。

7.根据权利要求1所述的方法，其中通过使用拉普拉斯压力梯度将样品混合物分成亚纳升微滴。

8.根据权利要求1所述的方法，其中通过使用剪切应力将样品混合物分成亚纳升微滴。

9.根据权利要求1所述的方法，其中使用相机监测亚纳升微滴中的报道分子的光学特性。

10.根据权利要求1所述的方法，其中所述报道分子是荧光染料。

11.根据权利要求1所述的方法，其中所述报道分子是刃天青染料。

12.根据权利要求1所述的方法，其中所述报道分子是四唑染料。

13.根据权利要求1所述的方法，其中监测亚纳升微滴的光学特性还包括使用光源激发报道分子。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述光源是发光二极管(LED)。

15.根据权利要求1所述的方法，其中所述亚纳升微滴的孵育在恒定温度下进行。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述恒定温度为37℃。

17.根据权利要求1所述的方法，其中对微生物进行分类包括按种、属、科、目、纲、门、界或其组合对微生物进行分类。

18.根据权利要求1所述的方法，其中对微生物进行分类包括按革兰氏染色分组对微生物进行分类。

19.根据权利要求1所述的方法，其中对微生物进行分类包括按属和种识别微生物。

20.根据权利要求1所述的方法，其中对微生物进行分类包括将亚纳升微滴波形与储存的波形库进行比较。