[发明专利]ExPEC糖缀合物疫苗配制品

说明书

描述了用于诱导针对肠外致病性大肠杆菌(ExPEC)的免疫应答的组合物和方法。具体地，描述了可以禁得起多种环境胁迫的包含共价结合至铜绿假单胞菌的外毒素A(EPA)载体蛋白的大肠杆菌抗原多糖的多价疫苗。

技术领域

本发明涉及用于诱导针对肠外致病性大肠杆菌(ExPEC)的免疫应答的组合物。具体地，本发明的实施例涉及包含共价结合至载体蛋白的大肠杆菌多糖抗原的缀合物的多价疫苗，其可以禁得起多种环境胁迫。

背景技术

肠外致病性大肠杆菌(ExPEC)是人类中最常见的革兰氏阴性病原体，并且可以引起胃肠道外的不同感染，这会导致多样并且严重的疾病，从而引起显著的发病率和死亡率。在ExPEC菌株中不断增加的多元抗药性是治疗的障碍物并且导致不断增加数量的住院治疗和死亡，以及不断增加的与ExPEC感染相关的医疗保健成本。

因此，迫切需要针对ExPEC的疫苗。O-抗原，表面脂多糖的组分，已经被鉴定为有希望的疫苗靶，并且被用作目前在研制阶段的糖缀合物疫苗种的抗原(参见例如Poolman和Wacker，2016，J.Infect.Dis.[传染病杂志]213:6-13)。

目前在研制阶段的针对ExPEC的糖缀合物疫苗包括ExPEC的不同血清型的O-聚糖，每一者都偶联至载体蛋白，例如铜绿假单胞菌的胞外蛋白A(EPA)(参见例如WO 2015/124769、和WO 2017/035181)。包含大肠杆菌血清型O25B、O1A、O2和O6A的O-聚糖的此种疫苗例如是在正在进行的2期试验中(临床试验政府标识符：NCT02546960)。

本发明的诸位发明人发现，尽管现有ExPEC疫苗配制品(25mM Tris pH 7.4，2.7mMKcl，137mM NaCl)对于在2℃-8℃下的短期储存和使用中的稳定性而言是可接受的，但是它在冷冻/融化时和在搅拌胁迫下不是稳健的。偶然冷冻、偶然加热、和搅拌(例如，在储存或运输期间)对ExPEC配制品的产品完整性具有不利影响。对于旨在用于大群体中使用的药用产品，例如针对ExPEC的糖缀合物疫苗而言，有益的是具有以下配制品：该配制品可以在低温下成批冷冻，并且在使用前，在融化后可以储存在约2℃-8℃下(即其中药品是大规模冷冻的并且长期储存，但是药物产品在使用时时储存在约2℃-8℃下，所以对于产品而言，至少一个冷冻-融化循环是不可避免的。此外，该配制品将优选还与不同材料相容，这样使得产品(例如糖缀合物)可以按不同规格储存(例如袋、瓶、小瓶、载药注射器、和/或可应用的装置)。

在本领域存在对于针对ExPEC的疫苗的配制品的需求，其可以禁得起多种环境胁迫(例如冷冻/融化、搅拌、高温、曝光、金属氧化剂暴露、等)并且导致组合物的更大稳定性和更长保质期，并且优选与多重处理的(例如容器)材料相容。源自环境胁迫的降解途径的任一种会导致降低的生物活性，并且还会潜在地导致形成配制品的组分的副产物或衍生物，因此导致ExPEC疫苗的增加的毒性和/或改变的免疫原性。因此，需要专门定制的方法来找到糖缀合物疫苗的稳健配制品，从而确保在很宽的范围的条件下的稳定性。将需要选择，确切地说是组合缓冲液类型、pH、和专门化的赋形剂，并且随后细致地优化来使糖缀合物疫苗保持化学上、物理上、以及生物学上稳定。鉴于所有这些因素都可以变化，找到用于配制针对ExPEC的糖缀合物疫苗的最佳条件是具挑战性的，并且良好配制品的组成是事前不可预测的。

因此，本领域对于确保疫苗组合物可以禁得起多种环境胁迫并且具有改进的稳定性和更长的保质期的针对ExPEC的糖缀合物疫苗的配制品存在需要。本发明的目的是提供此类配制品。

发明内容