[发明专利]胰岛素制剂的生物测定法

说明书

本发明涉及口服制剂中的胰岛素肽和液体制剂中的低亲和力胰岛素肽的生物测定法，其通过对磷酸化的Akt进行定量，从而在效力确定中避免赋形剂的干扰。

技术领域

本发明涉及针对口服制剂中的胰岛素肽和液体制剂中的低亲和力胰岛素肽的生物测定法。

序列表的援引并入

名称为“SEQUENCE LISTING”的序列表(6225字节)创建于2016年10月24日，并通过引用并入本文。

发明背景

生物测定法是生物学测定(体内测定、离体测定、基于细胞的体外测定、结合测定、生化测定等)，其用于各种目的，如工艺开发、工艺表征和产品开发；原料药(drugsubstance)或药物产品的产品发布测试；过程中控制和中间体测试；稳定性和产品完整性测试等。生物测定法也用作定性试验，即效力或生物鉴别试验。生物测定法易受许多变量的影响，因此活性在测定法之间可能不同。相对于标准，效力的绝对量度比活性量度更易变。因此，使用相对效力方法，其中相对于由类似材料构成的指定标准/参考来测量组分的活性。

效力是以产生给定强度的效果所需的量来表示的药物活性的量度。高效药物在低浓度下会引起特定反应，而较低效力的药物仅在较高浓度时才会引起相同的反应。效力取决于药物的亲和力和效能两者。亲和力是药物与受体结合的能力。效能是受体占据与在分子水平上启动反应的能力之间的关系。

效力的确定通常受基质的影响，这意味着制剂的赋形剂可干扰生物测定法的性能。这通常被称为“基质效应”。这代表了一个技术问题，因为在常规测定中，赋形剂的基质效应妨碍测试药物的效力。口服制剂中的胰岛素和液体制剂中的低亲和力胰岛素对生物测定法而言具有挑战性，因为这些制剂的赋形剂干扰测定法的性能，并且妨碍通过诸如胰岛素受体磷酸化测定和报道基因测定等常规测定来确定效力。

本发明的目的是克服或改善现有技术的至少一个缺点，或提供有用的替代方案。

发明内容

本发明涉及口服制剂中的胰岛素肽和液体制剂中的低亲和力胰岛素肽的生物测定法。

在一个方面，本发明涉及测量药物产品相对于原料药的效力的方法，其中该方法包括对磷酸化的Akt进行定量的步骤，其中所述药物产品是口服制剂中的胰岛素肽，或者是液体制剂中的低亲和力胰岛素肽。

本发明还可以解决从示例性实施方案的公开内容中将会明显看出的其他问题。

附图简述

图1：口服制剂中的A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-gGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素的InsR磷酸化测定。

图2：液体制剂中的A14E,B16E,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-gGlu-2xOEG),desB30人胰岛素(低亲和力胰岛素)的InsR磷酸化测定。

图3：口服制剂中的A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素的报道基因测定。

图4：液体制剂中的A14E,B16E,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-gGlu-2xOEG),desB30人胰岛素(低亲和力胰岛素)的pAkt测定。

图5：口服制剂中的A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素的pAkt测定。