[发明专利]用于病毒特异性T细胞的活化和扩增的平台

权利要求书

1.一种产生病毒抗原特异性T细胞的方法，其包括在IL-7和IL-15的存在下用抗原呈递细胞刺激外周血T细胞群的步骤，其中所述抗原呈递细胞暴露于肽文库或预先暴露于肽文库，其中所述肽包含对应于一种或多种非HPV病毒的一种或多种蛋白质的至少部分序列的序列，其中所述方法包括以下一种或多种：

(a)所述方法在不存在IL-4的情况下进行；

(b)IL-15的浓度≥100ng/mL；和

(c)所述方法包括耗竭外周血T细胞中的CD45RA阳性细胞。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述刺激在不存在IL-6、IL-12、IL-2、IL-21或其组合的情况下发生。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中与正常水平相比，外周血T细胞群具有以下一种或多种的降低的水平：1)NK细胞；2)能够作为旁邻细胞生长的幼稚细胞；和/或3)T调节细胞。

4.根据权利要求3所述的方法，其中外周血单核细胞(PBMC)或由其获得的外周血T细胞可能受降低以下一种或多种的水平的步骤的影响：1)NK细胞；2)能够作为旁邻细胞生长的幼稚细胞；3)T调节细胞和/或4)抑制性骨髓细胞。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述病毒来自疱疹病毒科或是痘病毒、腺病毒、多瘤病毒、慢病毒、弹状病毒或其他溶瘤病毒。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述病毒选自Epstein-Barr病毒(EBV)、巨细胞病毒(CMV)、腺病毒、痘苗病毒和/或水痘带状疱疹病毒(VZV)、HIV、流感、马拉巴病毒、水泡性口炎病毒和溶瘤病毒。

7.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述外周血T细胞存在于PBMC群中或从其获得或分离。

8.根据权利要求4或7所述的方法，其中耗竭PBMC或单采血液成分术产物的以下中的一种或多种：1)NK细胞；2)能够作为旁邻细胞生长的幼稚细胞；和/或3)T调节细胞。

9.根据权利要求4或7-8中任一项所述的方法，其中群体中的PBMC是非贴壁PBMC。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述抗原呈递细胞是树突细胞或PBMC。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的方法，其中刺激步骤在共刺激细胞的存在下发生。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述共刺激细胞是CD80+、CD86+、CD83+、4-1BBL+或其组合，或其中所述共刺激细胞是HLA阴性淋巴母细胞样细胞。

13.根据权利要求1-12中任一项所述的方法，其中所述刺激在活化的T细胞、树突细胞、PBMC或HLA阴性共刺激细胞的存在下发生。

14.根据权利要求13所述的方法，其中当刺激在活化的T细胞、树突细胞、PBMC或HLA阴性共刺激细胞的存在下发生时，该刺激步骤不是第一刺激步骤。

15.根据权利要求13或14所述的方法，其中活化的T细胞对个体是自体的。

16.根据权利要求1-15中任一项所述的方法，其中所述刺激在肽混物、肽混物脉冲的自体活化T细胞的存在下、在HLA阴性共刺激细胞的存在下或在这两种都存在的情况下发生。

17.根据权利要求16所述的方法，其中当刺激在肽混物脉冲的自体活化T细胞的存在下、在HLA阴性共刺激细胞的存在下或在这两种都存在的情况下发生时，该刺激步骤不是第一刺激步骤。