[发明专利]修饰的糖蛋白和糖肽的表达

权利要求书

1.一种重组细胞，其包含编码甘露糖基转移酶的基因的遗传修饰，其中所述细胞产生具有N-连接聚糖谱的异源糖蛋白或糖肽，所述N-连接聚糖谱与来自在编码所述甘露糖基转移酶的基因中不包含所述遗传修饰的细胞的N-连接聚糖谱相比具有低至少25％的高甘露糖结构。

2.根据权利要求1所述的细胞，其中所述遗传修饰选自缺失、插入、置换或破坏。

3.根据权利要求1所述的细胞，其中所述遗传修饰是缺失，所述细胞是网粘菌纲细胞，且所述甘露糖基转移酶是α-1,3-甘露糖基转移酶。

4.根据权利要求3所述的细胞，其中所述甘露糖基转移酶属于EC2.4.1.258类。

5.根据权利要求1所述的细胞，其中所述糖蛋白是抗体。

6.根据权利要求5所述的细胞，其中所述异源糖蛋白选自由曲妥珠单抗、依库珠单抗、那他珠单抗、西妥昔单抗、奥马珠单抗、usteinumab、帕尼单抗和阿达木单抗或它们中任何一种的功能片段组成的组。

7.根据权利要求3所述的细胞，其中所述异源糖蛋白或糖肽具有的N-连接聚糖谱比来自不含所述甘露糖基转移酶缺失的网粘菌纲细胞的N-连接聚糖谱低至少50％的高甘露糖N-连接聚糖。

8.根据权利要求1所述的细胞，其中所述糖蛋白或糖肽具有的N-连接聚糖谱具有小于50％的高甘露糖结构。

9.根据权利要求3所述的网粘菌纲细胞，其选自由海洋壶菌属、裂殖壶菌属和破囊壶菌属组成的组。

10.根据权利要求3所述的细胞，其所述糖蛋白或糖肽与不包含甘露糖基转移酶缺失的细胞相比包含低至少25％的木糖部分。

11.根据权利要求10所述的细胞，其是海洋壶菌种。

12.根据权利要求10所述的细胞，其中所述糖蛋白或糖肽不包含含有木糖的N-连接聚糖。

13.根据权利要求1所述的细胞，其中所述糖蛋白或糖肽含有低至少50％的高甘露糖结构。

14.根据权利要求1所述的细胞，其中所述糖蛋白或糖肽相对于不包含所述甘露糖基转移酶基因修饰的细胞包含高至少25％的寡甘露糖结构。

15.根据权利要求1所述的细胞，其中超过50％的N-连接聚糖包含寡甘露糖结构。

16.根据权利要求15所述的细胞，其中所述的寡甘露糖结构包含Man3结构。

17.一种产生包含简化的N-聚糖谱的糖蛋白或糖肽的方法，包括：

a)在宿主细胞内的编码甘露糖基转移酶的基因中进行遗传修饰；

b)培养所述宿主细胞；

c)从具有简化的N-连接聚糖谱的细胞中收获糖蛋白或糖肽。

18.根据权利要求17所述的方法，其中所述甘露糖基转移酶是α-1,3-甘露糖基转移酶。

19.根据权利要求18所述的方法，其中所述甘露糖基转移酶属于EC2.4.1.258类。

20.根据权利要求18所述的方法，其中所述宿主细胞是网粘菌纲，所述遗传修饰是缺失，并且所述糖蛋白是抗体。