[发明专利]新颖的内-β-N-乙酰基氨基葡糖苷酶

权利要求书

1.一种具有以下性质(A)和(B)的多肽：

(A) 所述多肽包含与SEQ ID NO: 1所示的氨基酸序列具有75%或更多同一性和95%或更多相似性的氨基酸序列，且是不同于SEQ ID NO: 7的氨基酸序列的氨基酸序列；和

(B) 所述多肽在45-60℃的任何温度对复杂糖链表现出的水解活性和/或转糖基活性是最大活性值的40%或更多。

2.根据权利要求1所述的多肽，所述多肽具有以下性质(A)和(B)：

(A) 所述多肽包含与SEQ ID NO: 1所示的氨基酸序列具有75%或更多同一性和95%或更多相似性的氨基酸序列，和与SEQ ID NO: 1的氨基酸位置191-195的氨基酸序列对应的位置处的Leu-Ala-Lys-Leu-Leu (LAKLL)的氨基酸序列；

(B) 所述多肽在45-60℃的任何温度对复杂糖链表现出的水解活性是最大活性值的40%或更多。

3.根据权利要求1所述的多肽，其中在50℃对复杂糖链的水解活性是最大活性值的60%或更多。

4.根据权利要求1-3中的任一项所述的多肽，其中，除了具有性质(A)和(B)以外，(C)所述多肽在大肠杆菌中的重组表达中以10 mg/L培养物或更多的量产生。

5.根据权利要求1-4中的任一项所述的多肽，其中所述多肽与SEQ ID NO: 1的氨基酸序列的氨基酸位置54-341的区域具有85%或更多序列同一性。

6.根据权利要求1-5中的任一项所述的多肽，其中氨基酸D276、V223、W225、Y247和W248中的至少一个保持不变且优选地至少D276保持不变。

7.根据权利要求1-3中的任一项所述的多肽，其中所述多肽是由SEQ ID NO: 1的氨基酸序列组成的多肽或由在SEQ ID NO: 1的氨基酸序列中具有至少一个选自A128T、D333G、I434L、V460A、I527V、K569T、F610S和H626R的突变的氨基酸序列组成的多肽。

8.根据权利要求1所述的多肽，其中所述多肽由SEQ ID NO: 1-6中的任一个的氨基酸序列组成。

9.根据权利要求1-6中的任一项所述的多肽，其中所述多肽具有满足性质(A)的氨基酸序列且具有在SEQ ID NO: 23中所含的突变中的至少一个。

10.根据权利要求9所述的多肽，其中所述多肽具有在至少一个选自N172、D176、Y214、S216、L245、N246、T275、L306、F307和A310的氨基酸中的突变且具有增加的转糖基活性。

11.根据权利要求7所述的多肽，其中所述多肽具有至少一个选自以下的突变：

其中N172被置换为Gln、Asp、Gly、Ala、Phe、Cys、His、Ile、Ser、Thr、Val或Met的突变；其中D176被置换为Arg的突变；其中Y214被置换为Phe的突变；其中S216被置换为Val的突变；其中L245被置换为Ser的突变；其中N246被置换为Asp的突变；其中T275被置换为Ile的突变；其中F283被置换为Ser的突变；其中L306被置换为Ile的突变；其中F307被置换为Tyr的突变；其中A310被置换为Asp的突变；和其中E314被置换为Gln的突变。

12.根据权利要求9-11中的任一项所述的多肽，其中所述多肽具有其中W278被置换为Phe或Tyr的突变。

13.一种多核苷酸，其编码根据权利要求1-12中的任一项所述的多肽。