[发明专利]高效价的多黏菌素E2

权利要求书

1.制备多黏菌素E₂甲磺酸钠的方法，所述多黏菌素E₂甲磺酸钠包含4修饰产物、6修饰产物、8修饰产物，所述4修饰产物是指在多黏菌素E₂结构中Dbu的γ氨基被4个甲磺酸钠基取代，所述6修饰产物是指在多黏菌素E₂结构中Dbu的γ氨基被6个甲磺酸钠基取代，所述8修饰产物是指在多黏菌素E₂结构中Dbu的γ氨基被8个甲磺酸钠基取代，其中在HPLC图谱中以面积归一化法计，4修饰产物占30％-43％，6修饰产物占45％-55％，8修饰产物占7％-17％，并且，所述多黏菌素E₂甲磺酸钠的效价为不低于660μg/mg，所述方法包括：

(1)以硫酸多黏菌素E为原料，通过层析纯化得到纯度≥96％的硫酸多黏菌素E₂；

(2)将步骤(1)得到的硫酸多黏菌素E₂与甲醛溶液反应，其中硫酸多黏菌素E₂与甲醛的摩尔比为1:10-20，控制反应时间为2小时；

(3)向步骤(2)的反应产物中加入亚硫酸氢钠溶液，继续反应，其中硫酸多黏菌素E₂与亚硫酸氢钠的摩尔比为1:10-20，控制反应时间为18小时；

(4)通过超滤的方式纯化步骤(3)的反应液，超滤膜的截留分子量在1000-4000之间，向得到的超滤截留液中加入超滤截留液3.4倍体积的水，再进行超滤，再向得到的超滤截留液中加入超滤截留液3.4倍体积的水，如此反复多次，当电导率降至2.5mS/cm时停止超滤；

(5)将步骤(4)所得的超滤截留液进行冷冻干燥，得到多黏菌素E₂甲磺酸钠。