[发明专利]ERFE融合多肽组合物及使用方法

说明书

本文提供了ERFE融合多肽、组合物及其用于治疗例如治疗铁代谢紊乱的方法。

交叉引用

本申请要求于2016年10月3日提交的美国临时申请号62/403,302的权益，该申请的内容通过引用以其全文并入本文。

序列表

本申请附有以ASCII格式以电子方式提交并且通过引用以其全文并入本文的序列表。所述ASCII拷贝创建于2017年9月21日，被命名为45543_703_601_SL.txt，并且大小为45,472字节。

发明内容

本文描述了Erythroferrone(ERFE)多肽，包括ERFE融合多肽，在一些实施方案中，其被称为例如ERFE多肽、ERFE肽、ERFE片段、ERFE多肽片段、ERFE模拟物、融合蛋白或ERFE截短物。本文提供了具有ERFE活性的新型ERFE多肽和融合蛋白，包括在一些实施方案中具有ERFE活性的ERFE多肽和融合蛋白，该ERFE活性包括但不限于调节铁调素的水平和活性以及血液铁水平。

在一些方面，提供了ERFE融合多肽，其包含(a)具有与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:8的多肽至少85％相同的序列的ERFE多肽，以及(b)异源多肽。在一些实施方案中，所述ERFE多肽至少包含具有SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:8的多肽的至少约10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、310、320、330、340个或更多个氨基酸的野生型ERFE的片段。在一些实施方案中，所述ERFE多肽由具有SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:8的多肽的至少约10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、310、320、330、340个或更多个氨基酸的野生型ERFE的片段组成。在一些实施方案中，所述ERFE多肽包含与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:8的多肽至少85％相同的约140个至约320个氨基酸。在一些实施方案中，所述ERFE多肽具有与选自SEQ IDNO:4、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:12和SEQ ID NO:14的多肽至少85％相同的序列。在一些实施方案中，所述ERFE多肽具有与选自SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6、SEQ IDNO:10、SEQ ID NO:12和SEQ ID NO:14的多肽至少90％相同的序列。在一些实施方案中，所述ERFE多肽具有与选自SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:12和SEQ IDNO:14的多肽至少95％相同的序列。在一些实施方案中，所述ERFE多肽具有与选自SEQ IDNO:4、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:12和SEQ ID NO:14的多肽99％相同的序列。在一些实施方案中，所述异源多肽选自钙调蛋白、多谷氨酰胺、E标签、FLAG、HA、His、Myc、S标签、SBP标签、Sof标签1、Sof标签3、Strep标签、TC标签、V5、VSV、Xpress、Isopep标签、Spy标签、Snoop标签、BCCP、GST、GFP、Halo标签、MBP、Nus标签、硫氧还蛋白、白蛋白、抗体、Fc结构域及其组合。在一些实施方案中，所述异源多肽是Fc结构域。在一些实施方案中，所述抗体包括抗白蛋白抗体。在一些实施方案中，所述抗体将所述融合多肽靶向至特定的细胞或组织。在一些实施方案中，所述异源多肽在所述ERFE多肽的N末端处。在一些实施方案中，所述ERFE多肽具有与SEQ ID NO:4至少85％相同的序列，并且所述异源多肽包含Fc结构域，其中所述异源多肽与所述ERFE多肽的N末端融合。在一些实施方案中，所述ERFE多肽具有与SEQ ID NO:6至少85％相同的序列，并且所述异源多肽包含Fc结构域，其中所述异源多肽与所述ERFE多肽的N末端融合。在一些实施方案中，所述ERFE多肽具有与SEQ ID NO:10至少85％相同的序列，并且所述异源多肽包含Fc结构域，其中所述异源多肽与所述ERFE多肽的N末端融合。在一些实施方案中，所述ERFE多肽具有与SEQ ID NO:12至少85％相同的序列，并且所述异源多肽包含Fc结构域，其中所述异源多肽与所述ERFE多肽的N末端融合。在一些实施方案中，所述异源多肽在所述ERFE多肽的C末端处。在一些实施方案中，所述融合多肽调节ERFE活性。在一些实施方式中，所述多肽形成同源多聚体。在一些实施方案中，所述同源多聚体是同源二聚体。在一些实施方案中，提供了编码上述融合多肽中的任一种的多核苷酸。在一些实施方案中，提供了包含上述融合多肽中的任一种的修饰多肽。在一些实施方案中，所述修饰选自糖基化和磷酸化。在一些实施方案中，提供了包含上述融合多肽中的任一种、上述多核苷酸或上述修饰多肽中的任一种以及赋形剂的组合物。在一些实施方案中，所述赋形剂包括由马来酸、酒石酸、乳酸、柠檬酸、乙酸、碳酸氢钠、磷酸钠、组氨酸、甘氨酸、氯化钠、氯化钾、氯化钙、氯化锌、水、右旋糖、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜、N,N-二甲基乙酰胺、乙醇、丙二醇、聚乙二醇、二甘醇单乙醚和聚氧乙烯-失水山梨糖醇单油酸酯组成的组中的至少一种。在一些实施方案中，所述组合物包含另外的治疗剂。在一些实施方案中，所述另外的治疗剂是铁或红细胞生成素。在一些实施方案中，提供了上述融合多肽中的任一种、上述多核苷酸、上述修饰多肽中的任一种或上述组合物中的任一种，其用作药物。在一些实施方案中，提供了上述融合多肽中的任一种、上述多核苷酸、上述修饰多肽中的任一种或上述组合物中的任一种，其用于制备治疗铁代谢疾病或病症的药物。在一些实施方案中，提供了上述融合多肽中的任一种、上述多核苷酸、上述修饰多肽中的任一种或上述组合物中的任一种，其用于治疗铁代谢疾病或病症。在一些实施方案中，所述铁代谢疾病或病症选自血色素沉着、HFE突变血色素沉着、铁转运蛋白突变血色素沉着、转铁蛋白受体2突变血色素沉着、铁调素调节蛋白(hemojuvelin)突变血色素沉着、铁调素突变血色素沉着、青少年血色素沉着、新生儿血色素沉着、铁调素缺乏、输血性铁过载、地中海贫血、中间型地中海贫血、α地中海贫血、铁粒幼细胞贫血、卟啉症、迟发性皮肤卟啉症、非洲铁过载、高铁蛋白血症、血浆铜蓝蛋白缺乏、无转铁蛋白血症、先天性红细胞生成不良性贫血、慢性疾病性贫血、炎症性贫血、感染性贫血、低色小红细胞性贫血、缺铁性贫血、铁限制性贫血、铁难治性缺铁性贫血、慢性肾病性贫血、红细胞生成素抵抗、肥胖缺铁以及其他贫血。在一些实施方案中，所述铁代谢疾病或病症是地中海贫血。在一些实施方案中，所述铁代谢疾病或病症是中间型地中海贫血。在一些实施方案中，所述铁代谢疾病或病症是α地中海贫血。在一些实施方案中，所述铁代谢疾病或病症是β地中海贫血。在某些实施方案中，所述铁代谢疾病或病症是贫血。在某些实施方案中，所述铁代谢疾病或病症是铁限制性贫血、慢性疾病性贫血、炎症性贫血和慢性肾病性贫血。在一些实施方案中，所述铁代谢疾病或病症是铁限制性贫血。在一些实施方案中，所述铁代谢疾病或病症是慢性疾病性贫血。在一些实施方案中，所述铁代谢疾病或病症是炎症性贫血。在一些实施方案中，所述铁代谢疾病或病症是慢性肾病性贫血。在一些实施方案中，所述治疗减轻铁代谢疾病或病症的至少一种症状。症状包括但不限于慢性疲劳、关节疼痛、腹痛、肝病(例如，肝硬化、肝癌)、糖尿病、心律不齐、心脏病发作或心力衰竭、皮肤颜色变化(例如，青铜色、灰绿色)、月经期丧失、性欲丧失、骨关节炎、骨质疏松症、脱发、肝脏或脾脏肿大、阳痿、不孕症、性腺功能减退、甲状腺功能减退、垂体功能减退、抑郁、肾上腺功能障碍、早发性神经退行性疾病、血糖升高、肝酶升高、铁(例如，血清铁、血清铁蛋白)升高、无力、皮肤苍白、呼吸短促、眩晕、饮食欲望(dietary craving)、腿部刺痛或爬行感、舌头肿胀或酸痛、手脚冰冷、心跳快速或不规则、指甲脆弱以及头痛。在一些实施方案中，所述症状是疲劳。在一些实施方案中，所述症状是无力。在一些实施方案中，所述症状是皮肤苍白。在一些实施方案中，所述症状是呼吸短促。在一些实施方案中，所述症状是眩晕。