[发明专利]具有高热稳定性的可逆保护的核苷酸试剂

权利要求书

1.检测样品中的靶核酸序列的存在或不存在的方法，其包括：

a) 进行扩增步骤，其包括使所述样品与扩增试剂接触，如果样品中存在所述靶核酸序列则产生扩增产物；和

b) 检测所述扩增产物，

其中所述扩增试剂包含具有以下结构的修饰的核苷多磷酸：

其中B =嘌呤或嘧啶碱基，L=接头或无，Z=标记物或无，R=OH或O^-，R₁和R₂ = H或OH，n =1-7，X= O、S或NH，Y=可以化学或酶促除去的有机部分，且其中Y选自HO-CH₂-CH₂-S-S-CH₂-CH₂-、CH₃C(O)-S-CH₂-CH₂-，和CH₃CH₂C(O)OCH₂-。

2.权利要求1的方法，其中X=O且Y=可以通过还原剂化学除去的有机部分。

3.权利要求2的方法，其中所述还原剂选自三-(2-羧基乙基)膦、亚硫酸钠、β-巯基乙醇和二硫苏糖醇。

4.权利要求1的方法，其中X=O且Y=可以通过酯酶酶促除去的有机部分。

5.权利要求4的方法，其中所述酯酶是羧酸酯酶。

6.使用扩增试剂扩增靶核酸序列的方法，其中所述扩增试剂包含具有以下结构的修饰的核苷多磷酸：

其中B =嘌呤或嘧啶碱基，L=接头或无，Z=标记物或无，R=OH或O^-，R₁和R₂ = H或OH，n =1-7，X= O、S或NH，Y=可以化学或酶促除去的有机部分，且其中Y选自HO-CH₂-CH₂-S-S-CH₂-CH₂-、CH₃C(O)-S-CH₂-CH₂-，和CH₃CH₂C(O)OCH₂-。

7.权利要求6的方法，其中X=O且Y=可以通过还原剂化学除去的有机部分。

8.权利要求7的方法，其中所述还原剂选自三-(2-羧基乙基)膦、亚硫酸钠、β-巯基乙醇和二硫苏糖醇。

9.权利要求6的方法，其中X=O且Y=可以通过酯酶酶促除去的有机部分。

10.权利要求9的方法，其中所述酯酶是羧酸酯酶。

11.具有以下结构的修饰的核苷多磷酸：

其中B =嘌呤或嘧啶碱基，L=接头或无，Z=标记物或无，R=OH或O^-，R₁和R₂ = H或OH，n =1-7，X= O、S或NH，且Y选自HO-CH₂-CH₂-S-S-CH₂-CH₂-、CH₃C(O)-S-CH₂-CH₂-和CH₃CH₂C(O)OCH₂-。

12.权利要求11的修饰的核苷多磷酸，其中Y是HO-CH₂-CH₂-S-S-CH₂-CH₂-。