[发明专利]切割事件转导方法和产品在审
申请号: | 201780083453.7 | 申请日: | 2017-11-16 |
公开(公告)号: | CN110268054A | 公开(公告)日: | 2019-09-20 |
发明(设计)人: | A·M·霍奇斯;R·查泰勒 | 申请(专利权)人: | 通用生物传感器有限公司 |
主分类号: | C12N9/00 | 分类号: | C12N9/00;C12Q1/00 |
代理公司: | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人: | 史文静;黄革生 |
地址: | 澳大利亚*** | 国省代码: | 澳大利亚;AU |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 分子切割 结合事件 切割过程 切割事件 测定法 分析物 检测 活化 级联 介导 转导 放大 | ||
1.分子实体,包含:
a.酶,和
b.酶抑制剂复合体;
其中酶抑制剂复合体包含与接头部分连接的抑制剂部分;
其中接头部分能够与酶系留并且能够受切割剂切割
其中当接头部分与酶系留时,酶的活性受抑制;
其中当接头部分遭切割时,酶的活性增加。
2.根据权利要求1所述的分子实体,其中接头部分包含切割位点、远端侧和内侧,其中内侧和远端侧在切割位点的对面,其中抑制剂部分在内侧上的位置与接头部分连接并且接头部分能够在远端侧上的位置借助反应性种类与酶连接。
3.根据权利要求1所述的分子实体,其中接头部分包含至少两个切割位点,中间区域和至少两个远离中间区域的侧部,其中切割位点位于每个远端侧和中间区域之间,其中抑制剂部分在中间区域内与接头部分连接并且接头部分能够在远端侧上的位置借助反应性种类与酶连接。
4.根据权利要求2和3所述的分子实体,其中反应性种类能够直接或借助交联剂与酶形成共价键。
5.根据权利要求2和3所述的分子实体,其中通过施加紫外线、交联剂、活化剂、催化剂或热,接头部分的远端连接至酶。
6.根据权利要求2所述的分子实体,其中抑制剂部分以混有酶浓度的酶抑制剂复合体浓度与酶缔合;其中与分析试剂中待用的抑制型酶复合体浓度相比,所述浓度高。
7.根据权利要求1所述的分子实体,其中酶是氧化还原酶或切割酶。
8.根据权利要求1所述的分子实体,其中酶抑制剂复合体包含接头放大部分。
9.根据权利要求8所述的分子实体,其中接头部分能够受切割剂切割,其中对接头部分的切割导致(i)酶活化和(ii)接头放大部分形成和活化,所述接头放大部分能够切割第二接头部分或与其他组分接合时能够切割第二接头部分。
10.根据权利要求8所述的分子实体,其中当活化时,接头放大部分形成脱氧核酶或MNAzyme的一个或多个部分。
11.根据权利要求1所述的分子实体,其中切割剂是目标分析物并且其中酶的活性生成读出信号。
12.在分子中检测切割事件的方法,包括:
a.提供根据权利要求1所述的处于以下状态的实体,其中接头部分与酶系留并且酶的活性受抑制;
b.使试样经历(a);和
c.检测装置可读取信号;
其中检出到装置可读取信号显示切割事件。
13.根据权利要求12所述的方法,其中切割事件提示试样中存在分析物。
14.根据权利要求12所述的方法,其中(a)的实体包含于溶液和或试纸条中。
15.根据权利要求12所述的方法,其中检测步骤包括检测电压、电流、光学吸光度、颜色、荧光或化学发光的变化。
16.使用根据权利要求1所述的实体检测切割事件的试剂盒,包含:
a.一个或多个反应室;和
b.分析试剂,其包含根据权利要求1所述的处于以下状态的酶复合体,其中接头部分与酶系留并且酶的活性受抑制,
其中分析试剂处于溶液形式或干形式。
17.分子实体复合体,包含:
a.载体,和
b.放大性复合体;
其中放大性复合体包含在一个或多个位置与载体系留的接头部分;
其中当接头部分与载体连接时,放大性复合体的活性受抑制;和
其中当接头部分遭切割时,放大性复合体的活性增加。
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