[发明专利]具有弱化的免疫应答的缀合物

说明书

本发明涉及生理活性多肽和具有弱化的免疫应答的免疫球蛋白Fc的缀合物、制备缀合物的方法、包括缀合物的用于降低免疫应答的组合物、以及用于降低生理活性多肽的免疫应答的方法。进一步，本发明涉及维持缀合物对Fcγ受体和/或补体的内在结合亲和力降低的方法，以及包括该缀合物的组合物。

技术领域

本发明涉及生理活性多肽和具有弱化的免疫应答的免疫球蛋白Fc的缀合物、制备缀合物的方法、包括缀合物的用于降低免疫应答的组合物、以及用于降低生理活性多肽的免疫应答的方法。

此外，本发明涉及维持缀合物对Fcγ受体和/或补体的内在结合亲和力降低的方法，以及包括该缀合物的组合物。

背景技术

各种蛋白质疗法的缺点在于它们的血清半衰期太短，因此需要增加给予间隔或剂量。在这方面，已经对蛋白质缀合物或复合物进行了各种研究，其中载体如聚乙二醇、白蛋白、脂肪酸或抗体Fc区被连接以增加蛋白质的血清半衰期。迄今为止已知的关于这种蛋白质缀合物或复合物的研究主要旨在增加药物的血清半衰期，从而缩短药物给予的间隔，因此改善患者的便利性。然而，许多常规技术具有如由于例如由治疗性蛋白质和载体蛋白质之间的非特异性结合引起的空间障碍导致的蛋白质活性降低的问题。此外，在脂肪酸缀合物可逆地结合血清白蛋白以增加其血清半衰期的情况下，由于蛋白质和脂肪酸之间的可逆结合，存在对显著增加血清半衰期的限制，因此无法避免占蛋白质药物最大损失的肾清除率。

同时，除了血清半衰期增加的问题之外，蛋白质疗法还存在由于蛋白质疗法本身的免疫原性引起的不需要的免疫应答问题，因此难以预测患者的治疗模式，并且进一步，诱导了不期望的免疫应答，这导致蛋白质疗法的降低的效果、过敏反应和偶尔危及生命的自身免疫(Self Nonself.2010Oct-Dec；1(4):314-322)。

另外，已经努力使用免疫球蛋白片段来增加包括蛋白质在内的生理活性物质的半衰期。然而，免疫球蛋白Fc的CH2-CH3区域包括通过与抗体的内在Fcγ受体和/或补体结合而作为免疫效应子功能的区域。人抗体的Fc片段与Fcγ受体及其补体结合，以诱导抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)和补体依赖性细胞毒性(CDC)，从而激活针对抗原的免疫功能。已知Fcγ受体以各种方式参与到获得性免疫应答中，也参与到是先天免疫应答的抗体依赖性细胞介导的细胞毒性中。具体地，Fcγ受体响应于抗原-抗体复合物、抗原呈递以及B-淋巴细胞活化和浆细胞存活的调控而在树突细胞(DCs)的成熟中起作用。进一步，Fcγ受体参与调控抗体的产生和特异性，并且通过调控树突细胞的活性，它们用于在识别抗原肽后区分免疫原性或致耐受性应答(Nature review Immunology,2008,8:34-47)。Fcγ受体I和IIA主要分布在单核细胞、树突细胞、巨噬细胞和粒细胞中，Fcγ受体IIC和IIIA主要分布在NK细胞(自然杀伤细胞)中。Fcγ受体IIIB分布在粒细胞中并诱导免疫应答(Naturereview Immunology,2010,10:328-343)。同时，除了NK细胞和T淋巴细胞外，Fcγ受体IIB广泛分布在各种类型的淋巴细胞、骨髓细胞和粒细胞中。与其他类型的受体不同，它抑制B淋巴细胞活化和体液免疫应答，从而起到抑制过度免疫应答如自身免疫应答的作用(Naturereview Immunology,2008,8:34-47)。

因此，当免疫球蛋白Fc片段被用作增加生理活性物质的血清半衰期的载体时，可以通过将免疫球蛋白Fc片段与生理活性物质连接来增加半衰期，但是需要开发用于防止免疫球蛋白Fc片段激活免疫应答的方法。

此外，需要开发一种方法，用于防止由生理活性物质引起的不必要的免疫应答，同时维持显示治疗效果的API(活性药物成分)即生理活性物质本身的治疗效果。

发明内容

[技术问题]

本发明的目的是提供生理活性多肽-具有弱化的免疫应答的免疫球蛋白Fc片段的缀合物。