[发明专利]血浆微量样品中肿瘤源性细胞外囊泡的纳米等离激元定量

权利要求书

1.一种检测在细胞外囊泡(EV)上富集的癌症特异性蛋白质的方法，包括：

使含有EV的样品与缀合有针对EV分子的第一抗体的表面接触，以将所述EV与所述含有EV的样品分离；

从所述表面上除去所述含有EV的样品；

将所述表面与缀合有针对所述癌症特异性蛋白质的第二抗体的第一组纳米颗粒一起孵育；以及

通过检测所述第二抗体与所述EV之间的结合来检测所述癌症特异性蛋白质是否存在于所述含有EV的样品中。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述接触步骤还包括将所述表面与针对EV分子的所述第一抗体缀合，其中，所述EV分子选自由以下组成的组：CD63、CD81、CD9、CD24、CD26、CD10、肿瘤易感基因101(TSG101)、热休克70kDa蛋白质4(HSP70)、Rab-5b、程序性细胞死亡6-互动蛋白(AIP1/Alix)、水通道蛋白2(AQP2)、血管内皮生长因子受体1(FLT1)、含有岩藻糖残基的N-聚糖、磷酸胆碱、磷脂酰丝氨酸和鞘磷脂。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述孵育步骤还包括将所述表面与缀合有针对EV分子的第三抗体的第二组纳米颗粒一起孵育，其中：

所述EV分子选自由以下组成的组：CD63、CD81、CD9、CD24、CD26、CD10、TSG101、HSP70、Rab-5b、AIP1/Alix、AQP2、FLT1、含有岩藻糖残基的N-聚糖、磷酸胆碱、磷脂酰丝氨酸和鞘磷脂；以及

所述纳米颗粒包括多个纳米球、多个纳米棒或其组合。

4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述检测步骤还包括检测针对所述癌症特异性蛋白质的所述第二抗体与所述EV之间的结合；以及检测针对EV分子的所述第三抗体与所述EV之间的结合。

5.根据权利要求4所述的方法，其中，所述检测步骤还包括：

形成EV复合物，所述EV复合物包括EV、经由所述第二抗体结合至所述EV的第一纳米颗粒以及经由第三抗体结合至所述EV的第二纳米颗粒，其中，所述第一纳米颗粒与所述第二纳米颗粒相互作用，以在所述第一纳米颗粒与所述第二纳米颗粒之间达到一定距离时产生纳米等离激元；以及

检测所述纳米等离激元。

6.根据权利要求3所述的方法，其中，所述纳米颗粒包括金。

7.根据权利要求3所述的方法，其中，所述第一抗体不同于所述第三抗体。

8.根据权利要求3所述的方法，其中，所述第一抗体与所述第三抗体相同。

9.根据权利要求1所述的方法，还包括识别在EV上富集的所述癌症特异性蛋白质。

10.一种检测胰腺癌特异性蛋白质，肝配蛋白A型受体2(EphA2)，的方法，包括：

使含有EV的样品与缀合有针对EV分子的第一抗体的表面接触，以将所述EV与所述含有EV的样品分离；

从所述表面上除去所述含有EV的样品；

将所述表面与缀合有针对EphA2的第二抗体的第一组纳米颗粒一起孵育，以获得胰腺癌源性EV；以及

通过检测所述第二抗体与所述胰腺癌源性EV之间的结合来检测EphA2是否存在于所述含有EV的样品中。

11.根据权利要求10所述的方法，其中，所述接触步骤还包括将所述表面与针对EV分子的所述第一抗体缀合，其中，所述EV分子选自由以下组成的组：CD63、CD81、CD9、CD24、CD26、CD10、TSG101、HSP70、Rab-5b、AIP1/Alix、AQP2、FLT1、含有岩藻糖残基的N-聚糖、磷酸胆碱、磷脂酰丝氨酸和鞘磷脂。