[发明专利]分离的呈味肽及其制备方法和应用

权利要求书

1.由SEQ ID NO:1所示氨基酸序列组成的多肽或由SEQ ID NO:2~9所示核苷酸序列组成的核酸在制备食品中的用途，其特征在于，所述多肽用于呈味，所述核酸编码所述多肽。

2.根据权利要求1所述的多肽，其特征在于，所述多肽来源于蛹虫草。

3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，制备所述多肽的方法包括：

（1）原料预处理：蛹虫草于45~55℃烘干，经中药粉碎机粉碎，过60~100目筛；10~20g蛹虫草粉和100~200g纯化水混合均匀，煮制15~30min后，冷却至30~40℃；

（2）酶解：调节pH至6.0~7.0，按蛹虫草粉质量的0.5~2%加入风味蛋白酶和中性蛋白酶，在45~55℃下搅拌酶解4~6h；酶解完成后，于85~95℃水浴中灭酶10~30min；4000~6000×g离心10~20min，取上清液，得到蛹虫草酶解液；

（3）超滤分离：用截留分子量为5000 Da的超滤膜对蛹虫草酶解液进行分离，收集透过液，减压浓缩，冻干，得到组分P0；

（4）柱层析分离：组分P0复溶于纯化水中，使其浓度为5~15mg/mL；以纯化水为洗脱液，利用Sephadex G-15对其进行柱层析分离；收集各组分，减压浓缩，冻干，得到组分P1~P8；作感官评价，筛选出呈味阈值为0.02%~0.025%，呈味特性为鲜甜味的P3；

（5）反相高效液相色谱纯化：将组分P3配制成浓度为1~5mg/mL的溶液；采用资生堂CAPCELL PAK ADME色谱柱，用20mmol/L乙酸铵/乙腈进行洗脱，检测波长为214nm，收集组分P3-1~P3-4，减压浓缩，冻干；作感官评价，筛选出呈味阈值为0.029%~0.033%，呈味特性为鲜甜味的P3-3；

（6）氨基酸序列分析：利用电喷雾四极杆飞行时间质谱对P3-3的氨基酸序列进行分析。

4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述食品包括选自调味品、休闲食品、饮料的至少之一。