[发明专利]一种稳定同位素标记的甲睾酮及其合成方法

说明书

本发明公开了一种稳定同位素标记的甲睾酮及其合成方法。该合成方法包括以下步骤：S1：以稳定同位素标记的甲基卤代烷为原料，与镁粉在有机溶剂中反应后得到稳定同位素标记的格氏试剂甲基卤化镁；S2：以3‑乙氧基雄甾‑3,5‑二烯‑17‑酮为原料在有机溶剂中，与步骤S1制备的格氏试剂甲基卤化镁发生加成反应生成稳定同位素标记的格氏物；S3：将稳定同位素标记的格氏物在有机溶剂中酸催化水解得到稳定同位素标记的甲睾酮。本发明的合成方法步骤简单，制备得到的稳定同位素标记的甲睾酮易分离提纯，化学纯度可达99.0％以上，同位素丰度在98.0％atm以上，充分满足国家对睾酮激素药物定量检测的需求。

技术领域

本发明涉及同位素标记领域，特别是涉及一种稳定同位素标记的甲睾酮及其合成方法。

背景技术

甲睾酮属于激素类甾体药物，临床上主要医治男性性功能衰退症及维持男性性器官的正常功能；妇科疾病，如月经过多、子宫内膜异位症；老年骨质疏松症及小儿再生障碍性贫血。虽然甲睾酮治疗相关疾病在我国已经很普遍，但在应用中依然存在很多问题。临床应用中的的不良反应如：肝损害，心脏病发作，卒中，滥用药物导致的高水平的激素可以诱发致病和致癌。因此国家药监总局建议加强睾酮激素水平的检测。

传统的药物残留检测方法主要有高效液相色谱法(HPLC)、液相色谱-质谱法(HPLC/MS)、薄层色谱法(TLC)、气相色谱法(GC)、气相色谱－质谱联机(GC/MS)、毛细管电泳(CE)等，但是这些方法普遍存在灵敏度低，方法繁琐，或只能进行半定量分析等缺点。

稳定同位素稀释质谱法IDMS(Isotope Dilution Mass Spectrometry)是采用与被测物质具有相同分子结构的稳定同位素标记的化合物作为内标物质，用高分辨液相色谱-质谱联用仪(LC-MS)进行检测，通过质谱仪测量相应质量数的离子的比值并与标准的比值比较达到准确定量的目的。采用同位素内标可以有效消除样品在化学和物理的前处理步骤中所引起的回收率差异，从而避免处理样品过程中的损失对检测结果造成的偏差。稳定同位素内标的特性与LC-MS的高灵敏度和处理复杂样品的能力结合，使得色谱-同位素稀释质谱技术被公认为测量微量及痕量有机物的基准定量方法，应用越来越广泛。

因此，有必要提供一种稳定同位素标记的甲睾酮-D3的合成方法，将为定量检测甲睾酮激素药物提供标准试剂，从而充分的满足国家药监总局对睾酮激素药物检测的需求。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种稳定同位素标记的甲睾酮及其合成方法，可作为定量检测睾酮激素药物的标准试剂；且制备过程简单，产品容易分离提纯，得到的产品化学纯度高。

本发明为解决上述技术问题而采用的技术方案是提供一种稳定同位素标记的甲睾酮的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：以稳定同位素标记的甲基卤代烷为原料，与镁粉在有机溶剂中反应后得到稳定同位素标记的格氏试剂甲基卤化镁；S2：以3-乙氧基雄甾-3,5-二烯-17-酮为原料在有机溶剂中，与步骤S1制备的格氏试剂甲基卤化镁发生加成反应生成稳定同位素标记的格氏物；S3：将稳定同位素标记的格氏物在有机溶剂中酸催化水解得到稳定同位素标记的甲睾酮。

进一步地，所述步骤S1中所述甲基卤代烷和镁粉的摩尔比为1：1-2，反应温度为30℃-60℃，反应时间为2-5小时。

进一步地，所述步骤S2中所述3-乙氧基雄甾-3,5-二烯-17-酮与甲基卤代烷的摩尔比为0.5-2：1，反应温度为30℃-60℃，反应时间为2-6小时。

进一步地，所述步骤S3中所述酸催化水解的温度为30℃-60℃，时间为2-6小时。

进一步地，所述甲基卤代烷为CD₃I、CD₃Br或CD₃Cl。

进一步地，所述步骤S1中的有机溶剂为四氢呋喃或乙醚。