[发明专利]一种编码溶菌酶释放蛋白的基因载体遗传稳定性的检测方法及应用

说明书

本发明提供了一种编码溶菌酶释放蛋白的基因载体遗传稳定性的检测方法及应用，属于生物工程领域。本发明通过复苏培养含有编码溶菌酶释放蛋白的基因载体质粒的宿主菌菌液，并进行连续多代的传代培养，间隔一定的代数取样并检测，通过检测人工保藏的含有编码溶菌酶释放蛋白的基因载体质粒的宿主菌的遗传稳定性，为研究编码溶菌酶释放蛋白的基因载体提供可靠的支撑和保障；将上述检测方法应用到编码溶菌酶释放蛋白的基因载体培养中，也可以为编码溶菌酶释放蛋白的基因载体的研究和培养提供参考和借鉴，具有重要的应用价值。

技术领域

本发明涉及生物工程领域，具体而言，涉及一种编码溶菌酶释放蛋白的基因载体遗传稳定性的检测方法及应用。

背景技术

猪链球菌是具有荚膜的一种革兰氏阳性球菌。可根据其细胞壁抗原成分将其大致归类为兰氏分群(Lancefieldgroup D)D群链球菌。

猪链球菌病主要表现为猪的败血性和局灶性淋巴结化脓性病症。猪链球菌的自然感染部位是猪的上呼吸道(特别是扁桃体和鼻腔)、生殖道和消化道。猪在各种动物中易感性较高。各种年龄的猪均可发病，但败血症型和脑膜脑炎型多见于仔猪，化脓性淋巴结炎型多见于中猪。病猪、I临床康复猪和健康猪均可带菌，当健康猪群引入带菌猪后，由于互相接触，病菌可通过口、鼻、皮肤伤口而传染。目前很少有针对编码溶菌酶释放蛋白的基因载体人工保藏的稳定性的研究。

发明内容

本发明的第一目的在于提供编码溶菌酶释放蛋白的基因载体遗传稳定性的检测方法，通过本检测方法，可以对编码溶菌酶释放蛋白的基因载体的遗传稳定性有较为可靠的认识，为编码溶菌酶释放蛋白的基因载体的研究提供可靠的支持。

本发明的第二目的在于提供上述编码溶菌酶释放蛋白的基因载体遗传稳定性的检测方法在编码溶菌酶释放蛋白的基因载体培养中的应用。

为了实现本发明的上述目的，采用以下技术方案：

一种编码溶菌酶释放蛋白的基因载体遗传稳定性的检测方法，包括：

于液体培养基中培养含有编码溶菌酶释放蛋白的基因载体质粒的宿主菌菌液；

连续传代培养宿主菌菌液；

间隔取样传代培养的宿主菌菌液并进行遗传稳定性检测。

上述编码溶菌酶释放蛋白的基因载体遗传稳定性的检测方法在编码溶菌酶释放蛋白的基因载体培养中的应用。

本发明的有益效果为：本发明通过复苏培养含有编码溶菌酶释放蛋白的基因载体质粒的宿主菌菌液，并进行连续多代的传代培养，间隔一定的代数取样并检测，通过检测人工保藏的含有编码溶菌酶释放蛋白的基因载体质粒在宿主菌中的遗传稳定性，为研究编码溶菌酶释放蛋白的基因载体提供可靠的支撑和保障；将上述检测方法应用到编码溶菌酶释放蛋白的基因载体培养中，也可以为编码溶菌酶释放蛋白的基因的研究提供参考和借鉴，具有重要的应用价值。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。

图1为本发明实验例4提供的第5代大肠杆菌的菌落形态图；

图2为本发明实验例4提供的第15代大肠杆菌的菌落形态图；

图3为本发明实验例4提供的第25代大肠杆菌的菌落形态图；

图4为本发明实验例4提供的第40代大肠杆菌的菌落形态图；

图5为本发明实验例4提供的第5代大肠杆菌PCR电泳结果图；