[发明专利]一种桑椹蛋白多糖、其制备方法及用途

权利要求书

1.一种蛋白多糖FMP-6-S4，其特征在于，包含重量百分含量为78％～82％的多糖和重量百分含量为18％～22％的蛋白；所述的多糖的组成为半乳糖醛酸，半乳糖，阿拉伯糖，鼠李糖和葡萄糖；其中，所述的多糖的结构单元是以1→4连接的α-D-吡喃半乳糖醛酸、1→2连接的α-L-吡喃鼠李糖为主链，而在α-D-吡喃半乳糖醛酸的C-3位上被α-L-吡喃己烯糖醛酸和β-D-吡喃半乳糖醛酸取代，在α-L-吡喃鼠李糖的C-4位上被α-L-呋喃阿拉伯糖、1,5-α-L-呋喃阿拉伯糖、β-D-吡喃半乳糖或β-D-吡喃葡萄糖、1,6-β-D-吡喃葡萄糖残基取代。

2.根据权利要求1所述的蛋白多糖FMP-6-S4，其特征在于，所述的多糖具有如结构式I所示的结构单元：

3.根据权利要求1所述的蛋白多糖FMP-6-S4，其特征在于，所述的蛋白多糖FMP-6-S4的重均分子量的范围为3-120kDa。

4.一种制备权利要求1所述的蛋白多糖FMP-6-S4的方法，其特征在于，所述的方法包括以下步骤：

a.蛋白多糖提取：

干燥的桑椹，粉碎，酶联水提，灭酶，离心，将所得滤液浓缩，透析、浓缩、离心、醇沉、离心、洗涤、干燥，得酶联水提桑椹粗蛋白多糖；

b.蛋白多糖纯化：

b1.取步骤a制备的桑椹粗蛋白多糖，水溶解，离心，上清液经阴离交换柱进行初步分级纯化，依次以水和0.05～0.3M的NaCl溶液洗脱，收集0.2M NaCl溶液的洗脱组分，得蛋白多糖FMP-6；

b2.将步骤b1制备的蛋白多糖FMP-6溶于0.01～1倍重量的0.2M NaCl溶液中，离心，上清液经凝胶色谱柱分离，收集合并蛋白多糖FMP-6-S4这一组分，浓缩，透析，冷冻干燥，得所述蛋白多糖FMP-6-S4。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，

所述步骤a包括：干燥的桑椹经粉碎机粉碎，加入15～20倍重量的水，于50～55℃下，分别加入桑椹重量的2～3％纤维素酶、桑椹重量的1～3％淀粉酶及桑椹重量的0.5～2％木瓜蛋白酶提取1～3h后，将温度升至100℃以上使酶失活，离心，滤液浓缩，透析，再浓缩，离心后，加入五倍～十倍于上清液体积的乙醇，离心得沉淀，沉淀经有机溶剂无水乙醇与丙酮洗涤三～六次，经真空干燥得酶联水提桑椹粗蛋白多糖，

所述步骤b包括：b1.取桑椹粗蛋白多糖，加入10～20倍重量的水中溶解，离心，上清液经阴离交换柱分离，依次以去离子水、0.05M、0.1M、0.2M及0.3M NaCl溶液洗脱，硫酸-苯酚检测，收集合并0.2M NaCl溶液的洗脱液，浓缩，离心，取上清液透析，冷冻干燥，得初步纯化的蛋白多糖FMP-6；

b2.将步骤b1制备的蛋白多糖FMP-6溶于0.01～1倍重量的0.2M NaCl溶液中，离心，上清液经凝胶色谱柱分离，收集合并蛋白多糖FMP-6-S4这一组分，浓缩，透析，冷冻干燥，得所述蛋白多糖FMP-6-S4。