[发明专利]一种具备高效中和活性的人源化抗人CD146单克隆抗体

说明书

本发明公开了一种具备高效中和活性的人源化抗人CD146单克隆抗体，具备高效中和活性的人源化抗人CD146单克隆抗体包括轻链可变区，及重链可变区。本发明在保持或增强抗体分子与人CD146受体分子结合活性的前提下，制备出人源化程度高的单克隆抗体，以避免该抗体作为治疗性抗体进入人体后导致的人抗鼠免疫反应，达到了很好的技术效果。

技术领域：

本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种具备高效中和活性的人源化抗人CD146单克隆抗体。

背景技术：

CD146是一种具有跨膜结构的黏附分子，是由646个氨基酸残基组成的I型膜蛋白，属于免疫球蛋白Ig超家族成员。研究表明CD146是血管内皮细胞生长因子受体VEGFR-2的共受体，能调节VEGF诱导的VEGFR-2的活化及下游信号的传递，进而促进肿瘤血管生成

(MicroRNA 329 Suppresses Angiogenesis by Targeting CD146.Molecularand Cellular Biology,2013；33(18):3689-99.)。另外，CD146分子是促进炎性肠病转化为结直肠肿瘤的重要因素，促炎性细胞因子TNFα及IL1β能够激活CD146的转录，使其在血管内皮细胞膜上高表达，进而通过促进炎性细胞侵润及血管新生导致慢性炎症的持续进展，演变为结直肠癌。通过一系列溃疡性结肠炎相关的肿瘤模型，研究人员发现特异性敲除血管内皮细胞的CD146，使炎症性肠病小鼠的症状明显的减轻，炎性细胞的侵润和新生血管明显减少；在血管内皮细胞特异性敲除CD146的肿瘤模型中，肿瘤的数量和体积也会明显下降Targeting endothelial CD146 attenuates neuroinflammation by limitinglymphocyte extravasation to the CNS.ScientificReports,2013；3:1687.。CD146分子在上皮性质的乳腺癌细胞中过表达使原本恶性程度较低的肿瘤细胞获得极高的细胞侵袭迁移能力，以及呈现出乳腺癌干细胞的特征。研究表明CD146通过EMT的机制促进乳腺癌进展，因此CD146可能作为治疗乳腺癌的一个新靶标(CD146,an epithelial-mesenchyamltransition inducer,isassociated with triple-negative breastcancer.Proceedingsof the National Academy of Sciences of the United States of America,2012；109(4)1127-32.)。

以CD146为靶点的抗体因其结构特征不同，导致其与CD146分子的亲和力而不同。P1H12能够与大多数不同类型的血管内皮组织结合(Identification of the S-Endo1endothelial-associated antigen.Biochem Biophys Res Commun.1996；218(1):210-6.)；有些anti-CD146抗体只结合肿瘤组织中处于生长活跃状态的血管，不结合正常组织中的血管。研究表明这些抗体识别不同的抗原表位，P1H12识别一个位于N端结构域的线性表位，而一些anti-CD146抗体识别基于二硫键的空间构象表位，因此造成对不同内皮组织结合活性的差异。CN102936283A也公开了一种鼠源CD146抗体，能够特异性识别上述人CD146抗原表位。

上述几种抗体均是鼠源性单克隆抗体，与人补体成分结合能力低，对肿瘤细胞的杀伤能力较弱；与NK等免疫细胞表面Fc受体亲和力弱，介导的ADCC作用较弱；并且鼠源抗体在人血循环中的半衰期短，具有免疫原性，因而宿主易产生抗抗体引起排斥反应等诸多不足。

目前，缺乏一种具备高效中和活性的人源化抗人CD146单克隆抗体。

发明内容：

有鉴于此，提出本发明。