[发明专利]一种含有能够降解4-氨基喹啉功能基因的质粒

说明书

本发明提供了一种含有能够降解4‑氨基喹啉功能基因的质粒。所述含有降解4‑氨基喹啉功能基因的质粒由菌株微杆菌Microbacterium sp.M.CWS5的菌液经过提取与纯化得到的。菌株微杆菌Microbacterium sp.M.CWS5在2017年10月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC No.14840。本发明得到的含有降解4‑氨基喹啉功能基因的质粒可以构建对4‑氨基喹啉具有降解功能的菌株，提高以4‑氨基喹啉为代表的多环芳烃污染物的生物降解效果，对于多环芳烃4‑氨基喹啉污染土壤及水体有应用潜力。

技术领域

本发明属于微生物学与分子生物学技术领域，具体涉及一种含有能够降解4-氨基喹啉功能基因的质粒。

背景技术

喹啉为典型的含氮杂环芳香烃化合物，属于石化废水中常见的污染物，具有较强的毒性，对生物体具有一定的致畸、致癌、致突变作用，对人体以及动植物体有着较大的潜在危害，能够通过食物链在包括人类的较高级生物体中进行积累，含喹啉污染物的大量排放对人类的健康以及自然环境会造成严重的威胁。目前喹啉的应用越来越广泛，用量不断增加，在环境中持久性的存在并不断扩散，已成为土壤环境和水环境中的常见污染物。在常规生物处理系统中难以达到良好的降解去除效果，为了降解废水中的喹啉，避免喹啉对自然环境和人类健康的影响，国内外研究者开展了大量研究工作，寻找喹啉处理的有效途径。对环境中喹啉的治理技术主要有物理法、化学法和生物法，其中生物法具有操作简单、运行费用低、无二次污染等优点。因此，构建喹啉高效降解菌来强化降解已成为去除喹啉污染的一种重要方法。

喹啉降解质粒是细胞内能够自我复制的双链环状的小分子DNA，能降解杂环族化合物的代谢酶通常是由降解质粒基因编码的。因此，喹啉降解质粒上携带了部分的降解基因信息，可通过转化作用连接到宿主细菌中构成重组菌，从而使重组菌表现相应的降解喹啉的性能。从喹啉降解菌株中提取与纯化得到喹啉降解质粒对于构建新的喹啉高效降解菌以及提高喹啉的降解性能都具有重要的意义。但是，国内外缺少关于喹啉降解质粒方面的研究报道。

发明内容

本发明提供一种含有能够降解4-氨基喹啉功能基因的质粒。所述含有降解4-氨基喹啉功能基因的质粒由菌株微杆菌Microbacterium sp.M.CWS5的菌液经过提取与纯化得到的。提取与纯化含有降解4-氨基喹啉功能基因的质粒所用的菌株微杆菌Microbacteriumsp.M.CWS5在2017年10月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，该中心位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，菌种保藏号为CGMCCNo.14840。

从菌株微杆菌Microbacterium sp.M.CWS5中提取与纯化含有降解4-氨基喹啉功能基因的质粒的具体方案为：