[发明专利]酮咯酸氨丁三醇或其制剂中酮咯酸氨丁三醇或/和杂质的HPLC检测方法

说明书

本发明公开了一种酮咯酸氨丁三醇或其制剂中酮咯酸氨丁三醇或/和杂质的HPLC检测方法，采用HPLC对待检溶液进行检测，根据色谱结果定性或定量。本发明针对酮咯酸氨丁三醇原料药及注射液中相关杂质的HPLC杂质检测方法，从检测波长、流动相体系的确定及供试品溶液浓度的筛选等角度进行优化和改进，并从系统适用性、降解专属性、检测限和定量限、线性及范围、精密度、准确度、溶液稳定性及方法耐用性等角度对本发明所述检测方法进行验证，结果显示，本发明所述方法具备良好的杂质检出能力。

技术领域

本发明属于物质检测技术领域，特别是涉及酮咯酸氨丁三醇或其制剂中酮咯酸氨丁三醇或/和杂质的HPLC检测方法。

背景技术

酮咯酸氨丁三醇，英文名称Ketorolac Tromethamine，简称KTT，CAS号74103-07-4。酮咯酸氨丁三醇是一种非甾体类抗炎药，能抑制前列腺素生物合成，生物活性与其S-型有关。动物研究显示酮咯酸氨丁三醇有镇痛作用，无镇静或抗焦虑作用。

根据KTT合成路线，可知其可能出现的杂质主要为降解杂质，比如，酮咯酸和氨丁三醇反应生成杂质A(CAS号167105-80-8)，酮咯酸在合成过程被氧化生成杂质B(CAS号154476-25-2，1-羟基酮咯酸)、杂质C(CAS号113502-52-6，1-酮基酮咯酸)、杂质D和杂质E(CAS号80965-09-9)，原料药中需对这5个降解杂质进行控制。另外，KTT注射液处方中由于有乙醇作为辅料，酸和醇可能发生反应生成酯，故制剂中除了控制原料药中的5个降解杂质，还需杂质F(CAS号108061-03-6)。

USP和EP药典中针对KTT原料药杂质的液相色谱检测中，存在以下不足：流动相盐相均为50mmol/L的磷酸二氢铵(用磷酸调节pH至3.0)，有机相为四氢呋喃，而四氢呋喃会对检测仪器造成一定的伤害。

发明内容

有鉴于此，本发明拟对KTT原料药及其制剂中杂质的HPLC检测方法进行优化改进，同时，本发明所述方法亦能够对KTT原料药及其制剂中KTT进行定性或定量检测。

本发明通过以下技术方案实现上述目的：

本发明提供了酮咯酸氨丁三醇或其制剂中杂质的检测方法，采用HPLC对待检溶液进行检测，根据色谱结果定性或定量，色谱条件包括：

色谱柱：C8硅胶色谱柱；

检测波长：检测波长200～400nm；

流动相及洗脱程序：流动相A为含有磷酸缓冲液的水相，pH为4.1～4.3；流动相B为乙腈和四氢呋喃的混合有机相，有机相中四氢呋喃的体积分数为10～15％；按如下梯度1～3任一程序进行梯度洗脱：

梯度1：

梯度2：

梯度3：

进一步，所述杂质包括杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F中的一种或两种以上的混合：

使用本发明检测方法，能够同时将上述A-F多个杂质与主成份进行有效分离，可以同时实现对其中一种或多种成分的有效检测。

进一步，所述磷酸缓冲液中含有磷酸二氢根离子和磷酸根离子，pH为4.1～4.3；进一步地，所述磷酸缓冲液为磷酸二氢铵-磷酸缓冲液；更进一步地，pH为4.2；更进一步地，磷酸二氢铵浓度为5.75g/L。

进一步，所述色谱柱规格为4.6×250mm，5μm。