[发明专利]11α-羟基-18-甲基诺龙的制备方法

说明书

本申请提供一种11α‑羟基‑18‑甲基诺龙的制备方法，包括以下步骤：将18‑甲基诺龙采用绿僵菌菌液转化，得转化液；将该转化液分离提纯，得11α‑羟基‑18‑甲基诺龙。上述11α‑羟基‑18‑甲基诺龙的制备方法，18‑甲基诺龙上的17位羟基，使其拥有更好的水溶性，在水中的溶出速率和传质效果均较优，采用绿僵菌菌液转化时，能与绿僵菌充分接触，转化更快，转化率更高，所得产物中副产物也较少，且分离提纯方法简单，提纯后的11α‑羟基‑18‑甲基诺龙相对18‑甲基诺龙的收率可高达70％～80％，适用于工业生产。

技术领域

本发明涉及微生物学技术领域，特别是涉及一种11α-羟基-18-甲基诺龙的制备方法。

背景技术

地索高诺酮作为新一代强效孕激素，对孕激素受体有较强亲和力和可靠的抑制排卵作用，而对雄激素受体亲和力低，只有轻微的雄激素和蛋白质同化代谢活性，且对脂代谢无不良影响，被国内外普遍认为是一种优于现代广泛使用的炔诺酮和18甲基炔诺酮的新型避孕药物。11α-羟基-18-甲基诺龙是合成地索高诺酮的关键中间体，目前，工业上主要采用化学方法合成11α-羟基-18-甲基诺龙，其步骤繁琐，成本较高。

从1952年首次将微生物应用到甾体转化中开始，微生物用于甾体的生产受到广泛关注，被认为是引入功能基团到甾体分子上的一种重要工具。相较甾体的化学合成方法，采用微生物转化方法反应条件温和，产物比较单一，具有很高的立体选择性和化学选择性，对于工业生产来说不仅经济而且效率高。

然而，微生物转化虽然克服了化学合成法中的大部分问题，但仍然存在一些弊端：如底物专一性不高，体积/时间效力较低；生产力达不到要求，产物提取困难，纯化比较繁琐(主要由于转化不完全，产物以底物-目的产物的混合结晶析出或含有副产物)，产物纯度等级不够等。到目前为止，虽然发现了一些有潜在应用价值的霉菌，但大多数菌对转化条件及操作要求较高，且副产物种类较多，真正能用于工业生产的不多。

因此，寻找一种适于工业生产的11α-羟基-18-甲基诺龙的微生物转化方法成为人们研究的热点。

发明内容

基于此，有必要提供一种适于工业生产的11α-羟基-18-甲基诺龙的制备方法。

一种11α-羟基-18-甲基诺龙的制备方法，包括以下步骤：

将18-甲基诺龙采用绿僵菌菌液转化，得转化液；

将所述转化液分离提纯，得11α-羟基-18-甲基诺龙。

在其中一个实施例中，所述转化的条件为：温度25℃～32℃，搅拌转速100rpm～200rpm，空气流量0.3vvm～0.7vvm，罐压0.02MPa～0.06MPa。

在其中一个实施例中，所述将18-甲基诺龙采用绿僵菌菌液转化之前还包括对18-甲基诺龙进行预处理的步骤：

将18-甲基诺龙粉碎至100～200目，加入消泡剂和水，在60℃～90℃保温灭活1～3小时即可。

在其中一个实施例中，所述18-甲基诺龙相对所述绿僵菌菌液的用量为5g/L～20g/L，所述消泡剂相对所述绿僵菌菌液的用量为0.1g/L～0.5g/L。

在其中一个实施例中，将所述转化液分离提纯，得11α-羟基-18-甲基诺龙的步骤具体为：

将所述转化液固液分离，得滤液和菌渣；

将所述菌渣用有机溶剂提取，得提取液；

将所述滤液用大孔吸附树脂吸附后，用有机溶剂洗脱，得洗脱液；

将所述提取液和洗脱液合并，浓缩、干燥、洗涤、过滤，得11α-羟基-18-甲基诺龙粗品；