[发明专利]一种检测麦角硫因的方法在审
申请号: | 201810023899.7 | 申请日: | 2018-01-10 |
公开(公告)号: | CN110018247A | 公开(公告)日: | 2019-07-16 |
发明(设计)人: | 姜文侠;许晟;刘琦;周子振 | 申请(专利权)人: | 中国科学院天津工业生物技术研究所;天津市中科诺识生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/34 |
代理公司: | 北京润平知识产权代理有限公司 11283 | 代理人: | 刘依云;严政 |
地址: | 300308 天津市滨*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 色谱柱 种检测 准确度 高压液相色谱分析 化学分析领域 待测样品 梯度洗脱 稳定性强 检测 洗脱 | ||
1.一种检测麦角硫因的方法,其特征在于,该方法包括:采用SB-aq色谱柱对可能含有麦角硫因的待测样品进行高压液相色谱分析。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,采用SB-aq色谱柱对待测样品进行高压液相色谱分析的条件包括:流动相为pH 2-6、水的体积占比为90-100vol%的乙腈-水或甲醇-水,紫外检测波长为250-260nm,柱温为15-40℃,流速为0.5-1.5mL/min。
3.根据权利要求2所述的方法,其中,流动相的pH为2.5-5;
和/或,流动相中,水的体积占比为95-100vol%;
和/或,紫外检测波长为257nm;
和/或,柱温为25-35℃;
和/或,流速为0.7-1.2mL/min。
4.根据权利要求1所述的方法,其中,所述方法还包括每次检测后对SB-aq色谱柱进行梯度洗脱,梯度洗脱的程序为:第1-7分钟,100%水;第8分钟,95vol%水+5vol%的甲醇或乙腈;第9-45分钟,线性变为100%的甲醇或乙腈,第45-52分钟,保持为100%的甲醇或乙腈,第53分钟变为100%的水,保持至60分钟结束;
或者,梯度洗脱的程序为:第1-7分钟,100%水;第8分钟,95vol%水+5vol%的甲醇或乙腈;第9-40分钟,线性变为100%的甲醇或乙腈,第40-45分钟,保持为100%的甲醇或乙腈,第46分钟变为100%的水,保持至52分钟结束;
或者,梯度洗脱的程序为:第1-8分钟,100%水;第9-20分钟,40vol%水+60vol%的甲醇或乙腈;第21-24分钟,线性变为100%的甲醇或乙腈,第24-30分钟,保持为100%的甲醇或乙腈,第31分钟变为100%的水,保持至38分钟结束。
5.根据权利要求1-4中任意一项所述的方法,其中,使用酸碱调节剂调节流动相的pH值,所述酸碱调节剂选自乙酸、磷酸、硼酸、甲酸、氨水和三乙胺中的至少一种。
6.根据权利要求1-4中任意一项所述的方法,其中,SB-aq色谱柱为Agilent ZORBAXSB-aq色谱柱。
7.根据权利要求1所述的方法,其中,所述待测样品为蕈菌发酵后得到的菌丝体的含水浸提液。
8.根据权利要求1所述的方法,其中,所述方法还包括计算高压液相色谱分析所得图谱上第5-6分钟所对应的峰面积,以对所述待测样品中的麦角硫因进行定量。
9.根据权利要求8所述的方法,其中,对所述待测样品中的麦角硫因进行定量的方法包括:
(1)制备含不同浓度的麦角硫因对照品溶液;
(2)对含不同浓度的麦角硫因对照品溶液分别采用SB-aq色谱柱进行高压液相色谱检测;
(3)根据麦角硫因对照品溶液的浓度和峰面积绘制标准曲线;
(4)根据标准曲线和高压液相色谱检测得到的峰面积,对待测样品中的麦角硫因进行定量。
10.根据权利要求1所述的方法,其中,所述待测样品中的麦角硫因含量为0.045μg/L至1000mg/L。
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