[发明专利]用于Hi5细胞制备猪圆环亚单位疫苗的培养基及其用法

权利要求书

1.一种用于Hi5细胞制备猪圆环亚单位疫苗的培养基，其特征在于：包括以下组分，单位以毫克/升计，各组分含量如下

葡萄糖1000-6000；

丙酮酸钠50-200；

精氨酸50-300；

天冬氨酸5-30；

谷氨酰胺300-1500；

赖氨酸100-200；

甲硫氨酸30-80；

色氨酸5-20；

丝氨酸5-20；

生物素0.001-0.2；

叶酸2-5；

烟酰胺2-10；

硫胺素2-10；

硫酸铜5-20；

硫酸铁0.1-2；

硫酸镁10-50；

硫酸软骨素30-40；

丝肽20-50；

氯化钠200-300；

氯化钾250-400；

磷酸氢二钠100-150；

磷酸二氢钠100-150；

亚硒酸钠20-50；

豆蔻酸0.01-0.2；

棕榈酸0.01-0.1；

棕榈油酸0.01-0.03；

转铁蛋白10-60；

胰岛素10-50；

表皮生长因子10-30；

白蛋白10-40；

软骨黏连蛋白20-40；

艾杜糖醛酸5-30；

亚麻酸10-20；

油酸10-20；

卵磷脂10-20；

棉子糖10-25；

水苏糖20-30；

胸苷0.2-2；

氯化镁200-500；

氯化钙150-300。

2.根据权利要求1所述的一种用于Hi5细胞制备猪圆环亚单位疫苗的培养基，其特征在于：包括以下组分，单位为毫克/升，

丙氨酸4-9；

胱氨酸5-50；

谷氨酸3-40；

甘氨酸3-30；

组氨酸2-10；

异亮氨酸20-30；

苯丙氨酸20-50；

脯氨酸10-30；

苏氨酸10-20；

色氨酸20-30；

酪氨酸10-20；

缬氨酸30-130。

3.根据权利要求1所述的一种用于Hi5细胞制备猪圆环亚单位疫苗的培养基，其特征在于：还包括以下组分，单位为毫克/升，

海藻酸钠20-40。

4.根据权利要求1所述的一种用于Hi5细胞制备猪圆环亚单位疫苗的培养基，其特征在于：还包括以下组分，单位为毫克/升，

花色苷20-50；

羟丁酸钠5-10。

5.根据权利要求1所述的一种用于Hi5细胞制备猪圆环亚单位疫苗的培养基，其特征在于：还包括以下组分，单位为毫克/升，

L-岩藻糖10-30。

6.根据权利要求1所述的一种用于Hi5细胞制备猪圆环亚单位疫苗的培养基，其特征在于：还包括以下组分，单位为毫克/升，

核黄素20-30；

腺嘌呤20-40；

吡哆醇5-10；

吡哆醛5-10；

吡哆胺5-10。

7.一种如权利要求1-6所述的用于Hi5细胞制备猪圆环亚单位疫苗的培养基的使用方法，其特征在于：步骤一，将用于Hi5细胞制备猪圆环亚单位疫苗的培养基置于生物反应器内，接种Hi5细胞后以灌流培养的方式培养Hi5细胞；步骤二，取表达PCV2Cap蛋白的重组杆状病毒和转染剂混合后，转染对数生长期的SF9细胞，培养细胞直至细胞出现变大、漂浮及破裂的细胞病变特征时收集细胞，离心取上清液，即为P1代重组病毒，将P1代重组病毒在SF9细胞上连续传代2次，获得P3代重组病毒，将P3代重组病毒接种与步骤1中的Hi5细胞中，继续培养直至细胞存活率低于30％后收获培养液，即可得到含有PCV2Cap蛋白的收获液。