[发明专利]一种HER2基因扩增检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种HER2基因扩增检测试剂盒，涉及分子生物领域。本发明公开的HER2基因扩增检测试剂盒，其含有探针溶液，探针溶液包括有用于稳定探针防止探针降解的探针稳定剂，该探针稳定剂包括如下组分：柠檬酸钠、NaCl、硫酸葡聚糖、去离子甲酰胺、Tris‑HCl以及EDTA。本发明的HER2基因扩增检测试剂盒将柠檬酸钠、NaCl、硫酸葡聚糖、去离子甲酰胺、Tris‑HCl以及EDTA组合可以较好地保护探针，防止探针在存放过程中降解，延长其保存期，提高试剂盒的耐存储性，且能确保检测结果的可靠性，避免假阴性结果。

技术领域

本发明涉及分子生物学领域，具体而言，涉及一种HER2基因扩增检测试剂盒。

背景技术

人类HER-2/neu基因(Her-2基因)基因定位于染色体17q21，其编码产物为185kD的跨膜精蛋白p185，由1255个氨基酸组成，720—987位属于酪氨酸激酶区。Her-2/neu蛋白是具有酪氨酸蛋白激酶活性跨膜糖蛋白，是EGFR家族成员之一。Her-2/neu蛋白由胞外的配体结合区、单链跨膜区及胞内的蛋白酪氨酸激酶区三部分组成，由于目前尚未发现能与Her-2/neu蛋白直接结合的配体。其主要通过与家族中其他成员包括EGFR(HERl/erbBI)，HER3/erbB3。HER4/erbB4形成异二聚体而与各自的配体结合。Her-2/neu蛋白常为异二聚体首选伴侣，且活性常强于其它异二聚体。当与配体结合后，主要通过引起受体二聚化及胞浆内酪氨酸激酶区的自身磷酸化从而激活酪氨酸激酶的活性。Her-2/neu蛋白通常只在胎儿时期表达，成年后只在极少数组织内低水平表达。然而在多种人类肿瘤中却过度表达，如乳腺癌、卵巢癌、肺腺癌、原发性肾细胞癌、子宫内膜癌等，并对预后效果具有提示作用。荧光原位杂交的方法检测乳腺癌细胞中Her-2/neu基因的扩增，作为判断预后以及乳腺癌药物治疗，尤其是抗HER-2单克隆抗体(赫赛汀)靶向治疗是一项有效的辅助检测手段。

目前检测HER2基因的方法包括:免疫组织化学(IHC)法检测HER2蛋白过表达、荧光原位杂交(FISH)法检测HER2基因拷贝数、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中人表皮生长因子受体2(HER2)配体结合域(ECD)的表达ECD或肿瘤组织中P185的表达量情况。

但病理常规工作中最实用的方法是IHC和FISH。IHC较FISH节约成本、简单易行，但容易受到组织处理方法、固定时间等影响，其结果判断和解释存在较大的变异，而FISH具有高度的重复性和可靠性。

但目前基于FISH法的检测HER2基因扩增中的探针条数多，混合存放时，易降解，导致检测结果的不稳定性，尤其容易出现假阴性检测结果，大大影响了检测结果的准确率和可信度。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种HER2基因扩增检测试剂盒，该试剂盒中的探针溶液中含有探针稳定剂，可以对探针进行保护，使其可以长时间存放，且可以较好地保证检测结果的准确性。

本发明是这样实现的：

一种HER2基因扩增检测试剂盒，其包括：探针溶液；

探针溶液含有：HER-2探针、CEN17探针以及探针稳定剂；

探针稳定剂包括如下组分：柠檬酸钠、NaCl、硫酸葡聚糖、去离子甲酰胺、Tris-HCl以及EDTA。

进一步，在本发明的一些实施方案中，探针稳定剂包括：2-10g/L柠檬酸钠、5-15g/L NaCl、80-150g/L硫酸葡聚糖、30％-80％去离子甲酰胺(体积比)、1-8mmol/L Tris-HCl以及0.05-1mmol/L EDTA。